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植物甾醇是广泛存在于植物油、植物种子中的活性物质,主要包括β-谷甾醇(β-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、菜油甾醇(campesterol)等。它具有降血脂与胆固醇等功能,在医学、生命科学等领域越来越受到重视。本文主要从实际应用的角度出发,以提高分离纯化后植物甾醇及其单体的纯度和得率为目标,通过实验得到最佳工艺参数,并通过高效液相色谱法进行含量检测,同时对检测条件进行优化,得到以下结论:(1)采用t检验法以精密度测定结果作为评判标准,对比分光光度计法和高效液相色谱法,结果表明高效液相色谱法结果良好,以此为以后实验的检测方法。同时对HPLC的检测条件进行优化,最终结果为检测波长210nm,流动相为100%甲醇,流速1.2mL/min,色谱柱温度为35℃。根据色谱原理对样品中的植物甾醇做定性分析。(2)本实验首先以甾醇提纯后的产品纯度和得率作为参考指标,对溶剂进行筛选,最终选择丙酮为溶剂。通过单因素和正交实验,以甾醇提纯后的产品纯度和得率作为指标,最后确定甾醇精制的最优条件为料液比1:6,养晶温度0℃,养晶时间4h。通过母液多次的循环利用,可以有利于甾醇得率的提升,减少损失。(3)本实验综合考虑,首先测定两种甾醇单体分别在环己酮和正丁醇中的溶解度曲线,后通过单因素实验确定正丁醇提纯β-谷甾醇的最佳工艺参数:料液比1:2,结晶温度35℃,结晶时间2h。通过单因素实验,确定环己酮提纯豆甾醇的最佳工艺参数:配制成饱和溶液,结晶温度25℃,结晶时间2.5h。