生物样品中元素EMAX定量分析方法研究

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X射线能量色散谱分析(X-ray energy dispersive microanalysis,EDX)是近30年来迅速发展起来的一门元素测试技术,能对样品做无损伤分析,具有操作简便迅速,试验结果解释明了,定位、定性、定量分析一次完成以及分析区域非常微小等一系列优点。特别是结合了透射电镜或扫描电镜后的能谱分析技术,是目前生物学领域中唯一能直接定位、定性、定量分析元素并和形态观察集于一体的仪器。   目前,国外在EDX微区分析技术方面已经做到了对样品的定量分析。然而我国在用分析电镜对生物样品进行分析尤其是对植物样品的分析中都还停留在定性、半定量水平。因此,在植物科学领域中,对样品浓度进行定量分析是我们今后研究的一个重要方面。   本文以Agarose作基质建立Pb、Cd、Zn、Na、K的块状和半薄生物标样,用我校分析测试中心安装的Hitachi S-3400NⅡ型扫描电镜及其附件Horiba公司的EMAX能谱仪进行测量。得到CPS-浓度的线性关系,并将这种方法进行初步应用,用于对重金属胁迫后的黑杨叶片和两种生境盐地碱蓬根的元素浓度测量,结果显示:   1.各元素标样的均匀度良好,多部位点扫法可行、可信;   2.半定量结果与真实浓度相差甚远,只可用于比较相对大小,浓度数据不可信;   3.所做标样线性关系良好,R2均大于0.9;   4.与块状标样相比,半薄标样中浓度和CPS值的相关性较好,精确度较高;   5.将我们的定量分析方法初步应用于对重金属胁迫的黑杨叶片和两种生境盐地碱蓬根中相应元素的测定,均得到较可靠的结论。   本文研究生物样品中元素的定量分析方法,首次提出EMAX定量分析的CPS-浓度法,并于两种生物样品中进行应用验证,该方法在生物学研究中具有重要的应用价值和前景。
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