BMPR-IB基因作为贵州白山羊多胎性候选基因的研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sunhuai
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绵羊的多胎性状是养羊业获得更多经济效益的重要途径。近年来在澳大利亚Booroola羊发现其存在多胎基因(FceB),并对其遗传特点、遗传效应等进行了广泛研究。随后的几年内,以其为候选基因在不同国家的绵羊品种中进行了更为广泛的发掘,我国在湖羊和小尾寒羊两个品种中都检测到了该基因,但是多胎基因在我国山羊中一直没有明确的报道。本研究采用贵州白山羊主要产区随机抽样法,在贵州省德江、惠水、睛隆、天柱和毕节等县的山羊养殖基地抽取了227只不同产羔率的贵州白山羊。在实验室采用PCR-RFLP、PCR-SSCP和Tetra-ARMS PCR方法分析了贵州白山羊多胎性候选基因BMPR-IB基因第5外显子至第10外显子在贵州白山羊中的多态性,并从分子水平探索贵州白山羊多胎性状的分子遗传机理。实验结果如下:1.在BMPR-IB基因第5外显子至第10外显子分别设计6对特异性引物,扩增出目的片段后进行PCR-SSCP分析,建立了最佳PCR-SSCP条件,对227只贵州白山羊进行了检测,结果只存在AA型个体。2.对BMPR-IB基因外显子6的扩增片段进行了RFLP分析。为便于检测大量样品,在引物R6中引入了一个点突变,使突变基因型的PCR产物产生一个AvaⅡ酶切位点,而非突变型样品中不含有该位点不能被切割。对227份贵州白山羊血液样品进行RFLP分析,均为1条140bp带,没有发现外显子6有单碱基突变,与其SSCP的检测结果一致。根据四引物ARMS-PCR的原理,设计两对特异性引物对BMPR-IB基因第6外显子进行扩增。对所采集到的227份贵州白山羊样品DNA进行检测,没有发现外显子6编码区746位有单核苷酸多态性,与其SSCP的检测结果一致。对贵州白山羊BMPR-IB基因的分析表明,BMPR-IB基因外显子5至外显子10中没有发现碱基突变,说明从绵羊、人的BMPR-IB基因中重要结构域GS和丝氨酸/苏氨酸激酶结构域发现的碱基突变在贵州白山羊中的自然发生率低,该基因在贵州白山羊群体中很保守,提示BMPR-IB蛋白的高度保守性对山羊的发育调控具有重要的意义。
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