由于存在生长缓慢，再生周期长等原因，兰花传统育种进展缓慢，从上世纪九十年代开始，许多研究者开始利用各种转基因技术(如基因枪法，农杆菌介导法。PEG法，电击法与花粉管通道法)探索兰花基因改良的最佳途径，其中农杆菌介导法以其操作简单，转化机理清楚等优点，得到越来越多的应用。就目前而言兰花的遗传转化还存在转化条件不够系统，转化效率低等问题，目前还主要处于研究阶段，很少应用，如何进一步完善体系，提高转化效率、增加可转化的兰花种类等成为目前的主要研究方向。本研究采用农杆菌介导法，以建兰的根状茎为受体材料，系统研究了影响农杆菌转化的因素，摸索了转化建兰根状茎的筛选体系，初步建立了建兰的转化系统。主要结果如下： 1、建立转化子筛选体系 利用固体，液体滤纸桥两种培养方式，分别以0、5 mg/L、10 mg/L、15 mg/L、20 mg/L、25 mg/L、30 mg/L、40 mg/L和0、10 mg/L、20 mg/L、25 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L浓度的Hyg梯度，对转化材料的筛选体系进行了摸索。发现不同的培养方式筛选效果不同，滤纸桥法褐化死亡速度比固体法快近两倍，为保证筛选的真实有效，最终确定固体培养法40 mg/L为筛选终浓度，筛选周期为30d左右。 2、确定转化的影响因子 研究了影响农杆菌转化的多种因素，寻求各种因素的最优水平。分别选择继代10、15、25 d的根状茎作为转化受体，经过3个月左右的筛选后，继代15 d材料的存活个数最高。预培养时间、侵染的0D600值、共培养时间、AS浓度的四种因素试验中，发现各因素的最优水平分别为：预培养1d，0D6000.8的重悬液侵染30 min，共培养2d，AS100μmol/L；使用200 mg/L的羧苄青霉素脱菌，在潮霉素40 mg/L下筛选得到具有潮霉素抗性的根状茎。 3、转化材料的PCR鉴定 从筛选得到的转化根状茎中抽提植物总DNA，以Egfp为模板设计引物，经PCR鉴定，扩增出目的条带，初步表明Egfp基因已经整合到建兰的根状茎中，得到了转化呈阳性的根状茎，所建立的建兰遗传转化体系的转化阳性率达到20％。