本实验进行了成年态柑橘茎段离体培养试验,并利用离体培养产生的不定芽进行茎尖微芽嫁接,得到了成活苗;同时对带明显黄化斑驳症状和未显症状的母本树不同柑橘品种进行微芽嫁接,均获得了成活苗,并对通过两种不同来源的茎尖嫁接成活的植株进行聚合酶链式反应(PCR)检测。主要的结果如下: 1.通过改进的消毒方法,减少了成年态柑橘茎段离体培养的污染率。试验表明,在炎热干燥的夏季晴天午后2点左右取半木质化茎段作为外植体培养材料,采用间隔2天消毒方法,能够将茎段污染率控制在10%以内。 2.通过对茎段离体培养,获得了茎段嫩芽,并且得到了几个品种的初代培养配方;对离体培养得到的嫩芽进行微芽嫁接,获得了成活的植株,成活率相对于田间的嫩芽都有不同程度的提高,最高的达到80%。 3.用不同浓度的6-BA对来自田间的茎尖进行不同时间的处理,效果存在较大的差别,试验发现用0.5mg/L至1.0mg/L的6-BA浸泡茎尖10min对供试品种成活率有不同程度的提高,最高的可达60%。 4.用两种不同浓度的消毒剂不同时间的处理各个供试柑橘品种的茎尖,微芽嫁接成活率表现出不同的效果。试验结果表明,用2%NaClO消毒7min效果较好。 5.根据黄龙病的病原的核苷酸序列设计PCR引物。利用PCR对带明显黄化斑驳症状的红江橙、宫川和通过茎尖微芽嫁接的成活的红江橙和宫川嫁接植株进行检测,结果带毒症状的植株扩增到特异性扩增区带,而嫁接的植株没有特异性区带,证明了茎尖微芽嫁接脱除了柑橘黄龙病病原,可以作为无病毒苗木繁殖的有效途径。