蒲公英是一味重要的临床常用中草药,集药用和食用于一身,具有淸热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。临床上主要用于治疗乳痈、瘰疬、疔疮肿毒、咽痛、肺痈、肠痈、目赤、湿热黄疸、热淋涩痛等症。药理试验表明,蒲公英具有广谱抗菌、保肝利胆、抗内毒素、健胃和免疫促进作用。目前,蒲公英在人医和兽医临床上主要用于各类炎症,特别是乳房炎。药理试验表明蒲公英具有较好的抗菌消炎作用,然而大多研究都是以蒲公英粗提物为研究对象的,其单体对临床乳房炎主要致病菌活性的研究报道较少。本试验目的是以临床乳房炎的5种主要致病菌追踪分离纯化蒲公英中具有抑菌活性的化合物单体成分,为临床乳房炎的治疗和应用奠定物质基础,同时也为蒲公英的药理研究和临床应用提供理论依据。本试验采用超声波新技术提取药用蒲公英的干燥全草,利用大孔吸附树脂柱分离,依次分别用蒸馏水、40 %和90 %乙醇溶液洗脱,用薄层层析紫外检测,将成分相同或相近的部分合并减压浓缩,可得水洗部分(A)、40 %乙醇洗脱部分(B)和90 %乙醇洗脱部分(C)。定性试验说明,A不含酚类、有机酸和黄酮类化合物;B可能含有酚类和有机酸类化合物,但不含黄酮类化合物;C可能含有黄酮类化合物。纸片法以临床乳房炎主要的5种感染菌株——金黄色葡萄球菌(S.Aureas)、大肠埃希菌(E.coli)、无乳链球菌(S.dysagalactiae)、停乳链球菌(S.agalactiae)和乳房链球菌(S.uberis)检测A、B、C三部分的抑菌活性,抑菌试验证明,A无抑菌活性,B和C有抑菌活性。对B和C用硅胶柱等进一步分离纯化,同时纸片法追踪各个分离部分的抑菌活性,直至得到5种化合物单体Ⅰ~Ⅴ。Ⅰ~Ⅴ的质量mg分别为12.7、17.0、4.0、20.0、1103.0。抑菌试验表明,化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌均有抑菌活性,Ⅳ无抑菌活性。其中Ⅴ对上述5种菌的最低抑菌浓度(MIC) mg/mL分别为0.1953×10-2、3.125×10-2、0.7813×10-2、12.5×10-2、0.3906×10-2,最低杀菌浓度(MBC) mg/mL分别为3.125×10-2、12.5×10-2、6.25×10-2、大于0.25、0.125。采用紫外可见分光光度计、GC-MS联用仪、核磁共振光谱仪、红外光谱仪和标准对照品等分析和鉴定化合物单体Ⅰ~Ⅴ的结构,Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ分别为1,2-二羟基-4,11(13)-桉双烯酮-12,6-交酯、1,3-二羟基-11(13) -桉双烯酮-12,6-交酯、正二十九烷烃和木犀草素。其中化合物Ⅰ、Ⅱ和正二十九烷均为首次从蒲公英中分离得到。