丝素蛋白复合止血材料的制备及其性能研究

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出血是创伤病人死亡的重要原因,因而止血处理是应急创伤治疗的首要任务。快速有效的止血是手术患者创伤后生命安全的必要保障。为了探究丝素蛋白材料在止血方面的应用,本文制备了丝素、明胶和海藻酸钙的复合多孔材料,研究了材料的内部形态结构,吸水性、力学性、凝血性和细胞相容性等性能。  首先,制备并研究了质量分数为3%的丝素/明胶复合多孔材料的性质。吸水性和压缩性的实验结果表明,随着明胶比例的增加,复合材料的吸水性逐渐增强,材料柔软性变差;当丝素/明胶比例为75:25时,材料的吸水性得到显著提高,瞬时吸水率和最大吸水率分别为1021%和1118%,材料的瞬时吸水率和最大吸水率分别增加15%和20%左右;SEM结果显示,随着明胶比例的增加,复合材料的孔隙逐渐增大;APTT、PT、TT凝血实验结果显示,正常血液凝血时间分别为35.62s、20.25s、26.23s,复合比例为50:50组凝血时间分别是26.73s、16.62s、19.13s,50:50组在凝血时间上分别减少25%、18%、27%左右,且各组之间存在显著性差异,这个结果与全血实验结果相似;血小板粘附实验结果显示,随着复合材料中明胶比例的增加,材料上粘附的血小板量逐渐增加,当质量比达到50:50以后,材料上血小板的数量达到最大值,当明胶比例继续增大时,材料上的血小板含量逐渐减小;纤维蛋白原实验结果显示,随复合材料中明胶比例的增加,材料上纤维蛋白的含量逐渐增加,当质量比达到50:50以后,材料上的纤维蛋白含量显著增加;细胞相容性结果显示,培养五天后,与对照组(TCP板)相比,复合材料中细胞生长良好,在细胞数量和形态上无明显差距,说明复合材料具有良好的细胞相容性。  其次,研究了质量分数为3%的丝素/海藻酸钙复合多孔材料的性质。吸水实验结果表明,随着海藻酸钙比例的增加,复合材料的吸水性先增加后减小,当丝素/海藻酸钙比例为75:25时,材料的吸水性达到最高,瞬时吸水率和最大吸水率分别为2033%和2267%,比质量比为100:0材料的瞬时吸水率和最大吸水率分别增加了170%和150%左右;压缩性实验表明,随着材料中海藻酸钙比例的增加,材料的柔软性逐渐变差;SEM结果显示,随着海藻酸钙比例的增加,各组材料的孔隙没有明显的差异;APTT、PT、TT凝血实验结果显示,对照组正常血液凝血时间分别为32.83s、19.26s、24.51s,复合比例为50:50组的材料凝血时间较短,分别是28.13s、14.49s、14.26s,凝血时间分别减少14%、25%、42%,与对照组有显著性差异;全血实验结果显示,复合比例为50:50组的材料凝血效果较优于其余各组;血小板粘附实验结果显示,随着复合材料中海藻酸钙比例的增加,材料上粘附的血小板量逐渐增加,当质量比达到50:50时达到最大值,当海藻酸钙比例继续增大时,材料上的血小板含量逐渐减小;纤维蛋白原实验结果显示,随着复合材料中海藻酸钙比例的增加,材料上纤维蛋白的含量逐渐增加;细胞相容性结果显示,培养五天后,复合材料上的细胞生长良好,在细胞数量和形态上与对照组相比无明显差距,说明复合材料具有良好的细胞相容性。  最后,研究了质量分数为3%的丝素/明胶/海藻酸钙复合多孔材料的性质。吸水性结果显示,质量比为1:1:1的材料的瞬时吸水率和最大吸水率分别是质量比为1:1:3材料的2.3倍和1.6倍;压缩性结果显示,质量比为1:1:3的材料的压强约是质量比为1:1:1材料的1.8倍,说明质量比为1:1:1:的材料的柔软性比质量比为1:1:3的更好;全血实验、APTT、PT、TT检测结果显示,两组材料凝血时间相近,没有显著性差异;血小板粘附实验结果显示,材料与血浆处理5min、10min时,处理液中质量比为1:1:1的材料的血小板较多,说明复合比例为1:1:1的材料上粘附的血小板较多,材料的血小板粘附效果较好;纤维蛋白原检测结果表明,质量比为1:1:1的材料的OD450值约是质量比为1:1:3的材料的两倍,说明质量比为1:1:1的材料具有较好的纤维蛋白吸附性;细胞相容性结果显示,复合比例为1:1:1组材料上的成纤维细胞在细胞数量、细胞形态上均与正常细胞没有太大差异,而复合比例为1:1:3组材料上的成纤维细胞虽然在细胞形态上与正常细胞没有太大差距,但是细胞数目明显较少,说明复合比例为1:1:1的材料具有良好的细胞相容性。
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