在生物系统中有过亚硝酸根生成的发现,使过亚硝酸根(ONOO-)逐渐成为生物学、医学等领域关注的对象。过亚硝酸根是强氧化剂,能够引发自由基链反应和硝化芳环,并进一步损伤生物大分子,特别是硝化损伤酪氨酸和蛋白质酪氨酸残基,生成3-硝基酪氨酸。3-硝基酪氨酸的形成被认为是体内硝化产物形成的生物标志,3-硝基酪氨酸与炎症、心血管疾病和神经退行性疾病等多种病症相关。因此,研究过亚硝酸根对酪氨酸的硝化损伤有着重要意义。生物体内存在的金属离子可参与ONOO-介导的硝化反应过程,这不仅会加剧酪氨酸的损伤,更重要的是可能会提高相关疾病的发病机率。找到具有促进硝化损伤作用的金属离子,不仅可以进一步揭示过亚硝酸根的生物活性和反应机制,也可以了解金属离子的生物作用和3-硝基酪氨酸相关疾病的发病机制。以Co(II)、Cu(II)对过亚硝酸根硝化损伤酪氨酸和蛋白质酪氨酸残基的促进作用以及维生素C对Co(II)、Cu(II)促进作用的抑制作用的研究为本论文的主要内容,该研究结果对揭示ONOO-的生理作用机制,了解相关疾病的发病因素并进行预防或治疗有着重要意义。本论文采用经过本实验室改良的亚硝酸异戊酯与过氧化氢反应的方法,合成过亚硝酸盐溶液。检测硝化产物的紫外吸收,建立过亚硝酸根损伤酪氨酸和蛋白质酪氨酸残基的实验条件,选择合适的反应物初始浓度。利用紫外分光光度法以硝化产物生成量作为指标,研究七种常见金属离子(MgCl2,MnCl2,CaCl2,ZnSO4,CuSO4,CoCl2,NiCl2)对过亚硝酸根硝化损伤酪氨酸和色氨酸的影响;并进一步研究Co(II)、Cu(II)的浓度与其促进硝化损伤作用之间的关系;在此基础上研究维生素C对Co(II)、Cu(II)促进硝化的抑制作用。对Co(II)、Cu(II)促进ONOO-硝化纤维蛋白原和牛血清白蛋白上酪氨酸残基的作用进行研究;讨论Co(II)、Cu(II)的浓度与其促进硝化损伤作用之间的关系和维生素C对Co(II)、Cu(II)的促进硝化损伤的抑制作用,利用三维荧光法对上述结果进行验证。