天然的缬氨酸是L构型，人工合成的缬氨酸有D构型和L构型。不同构型的氨基酸生成的药物具有不同的生物活性，因此，精准表征缬氨酸的手性具有重要的意义。
　　本论文主要通过两种方法对缬氨酸进行手性纯度的表征，分别是非手性固定相色谱法和手性固定相色谱法。
　　第一种方法是采用非手性固定相色谱法对缬氨酸进行手性纯度的表征。采用手性衍生试剂D-樟脑磺酰氯对缬氨酸进行衍生化，将(DL)-缬氨酸的对映异构体经D-樟脑磺酰氯衍生化转化为了非对映异构体D-樟脑磺酰-L-缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰-D-缬氨酸甲酯。由于这两种非对映异构体D-樟脑磺酰-L-缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰-D-缬氨酸甲酯属于两个不同的化合物，不具有对映异构体的特点，因此在非手性固定相色谱上即可分离，同时衍生化以后增强了缬氨酸的紫外吸收，提高了测定缬氨酸手性纯度的灵敏度。根据两个非对映异构体D-樟脑磺酰-L-缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰-D-缬氨酸甲酯在普通反相色谱峰上的面积差异，即可实现(DL)-缬氨酸手性纯度的表征。
　　具体衍生化过程为以缬氨酸为原料，经甲酯化反应得到产物缬氨酸甲酯。将缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰氯进行衍生化反应转化为D-樟脑磺酰-L-缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰-D-缬氨酸甲酯。
　　手性衍生化所得的两种非对映异构体产物D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯和D-樟脑磺酰-D-缬氨酸甲酯的最大吸收波长均为224nm。通过多次实验探索，得到分离两种非对映异构体的液相方法条件为60%甲醇+40%20mmol/L磷酸二氢钾（磷酸二氢钾调pH=4.0）、色谱柱为迪马1代C18(250mm×4.60mm,5μm)、柱温30℃，流速1mL/min。在该条件下D-樟脑磺酰化-D-缬氨酸甲酯出峰时间为6.793min，D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯在9.485min出峰，二者分离良好，分离度为2.015。
　　同时本文D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯外观为白色固体，D-樟脑磺酰化-D-缬氨酸甲酯为液体，D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯经差示扫描量热仪测得其熔程为93.68℃～99.68℃。采用了傅里叶红外吸收光谱和核磁共振氢谱表征了D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯，经谱图归属，确证了D-樟脑磺酰化-L-缬氨酸甲酯为目标产物。
　　第二种方法是采用手性固定相色谱法对缬氨酸进行手性纯度的表征。通过CSP-HPLC-UV测定缬氨酸e.e.值。通过多次实验探索，得到分离(DL)-缬氨酸的液相方法条件为：10%四氢呋喃+90%2mmol/L硫酸铜、色谱柱为SUMICHIRAL OA-6100手性柱；检测波长为220nm；柱温为30℃；流速为1mL/min。D与L-缬氨酸保留时间10.361min、16.872min。二者分离良好，分离度为3.688。
　　本论文的创新之处在于采用D-樟脑磺酰氯作为手性衍生化试剂对缬氨酸进行衍生化反应，采用非手性固定相色谱法测定d.e.值，间接表征了缬氨酸的手性纯度，降低了表征手性纯度对手性固定相色谱柱的依赖，目前未见文献的报道。