冠状静脉窦(简称冠状窦，CS)系统作为心脏冠状静脉的主要组成成分，接受75％以上冠状动脉血液回流。在心脏介入操作、心脏搭桥手术以及近年心脏再同步化起搏治疗中具有重要作用，正在成为心血管领域新的研究热点。 传统右心房、右心室起搏导致起搏电极诱发的血栓栓塞早已得到证实。近年来，随着左心起搏在严重心力衰竭，复杂心律失常等方面应用的增加，导管诱发的血栓栓塞成为人们关注的课题。为了解左心系统起搏造成的血栓对于起搏阈值、心脏结构功能的影响，我们选择与人体心脏、血管结构最为接近的动物——猪作为实验对象，模拟人体左心起搏电极诱发血栓的病理特点，建立心大静脉血栓的动物模型，并且对血栓形成后心脏不同部位、不同时间起搏阈值进行测定，通过光镜和电镜观察心脏的结构变化，利用超声心动图了解心脏整体功能，应用免疫组化和流式细胞检测技术对心脏不同部位Cx43、MMP-2、MMP-9表达、心肌细胞凋亡、bcl-2、Bas基因变化进行分析，同时，观测血小板、血管内皮、凝血、抗凝等指标在心大静脉血栓后的变化。全面、系统了解心大静脉血栓发生后，上述因素的作用，为心大静脉血栓研究提供实验模型、数据和方法。 第一部分心大静脉血栓动物模型的建立目的：建立猪心大静脉血栓模型。 结果：1所有动物完成心大静脉弹簧圈放置，技术成功率100％。24只动物心大静脉完全阻塞，模型成功率为92.31％。 2手术前后心率、血压比较无统计学差异；3比较手术前、弹簧圈放置5分钟后心电图，结果未见心率、心律变化及ST-T改变。 4大体及组织学检查：局部心肌、血管水肿明显，管腔内可见红褐色血栓充填。光镜下表现为管壁轻度增厚，血栓内富含红细胞，心肌纤维水肿。以后心肌、血管水肿逐渐减轻，白细胞迁移入血栓内，管壁成纤维细胞增生，管壁增厚，与血栓发生机化粘连，结缔组织增生；4周时血管周围可见心肌局限扩张，管腔内血栓红白相交，镜下血栓中出现小血管并可见坏死物质裂解碎片和小的再通缝隙。 结论：采用介入方法，经冠状窦放置COOK弹簧圈于心大静脉制作猪心大静脉血栓模型，手术成功率高、动物存活率高的特点。应用导管穿刺技术造成的动物损伤小、恢复快，短期内可进行重复、多次操作。组织学检查符合血栓的病理过程，是模拟体内机械性阻塞造成血栓形成较好的动物实验模型。 第二部分心大静脉血栓后心脏起搏阈值以及Cx43的变化目的：多部位起搏用于治疗严重心力衰竭和预防房颤，但是，冠状静脉阻塞后左右心起搏阈值有何变化还不得而知。本部分研究目的为了解心大静脉(GCV)血栓后不同时间以及不同部位起搏阈值和Cx43的变化。 结果：1在弹簧圈组，心大静脉阻塞前，右室心尖部起搏阈值(0.43±0.10(V))低于左室心尖部(0.54±0.15(V))，左室游离壁(0.68±0.14(V)，p＜0.05)和左室间隔部(0.68±0.19(V)，p＜0.05)；右室心尖部起搏阈值与左室心尖部比较，无统计学差异。在心大静脉阻塞1小时和1周后，右室心尖部和左室心尖部起搏阈值升高，以后逐渐降低，在第2周检测时，与手术前比较已无统计学差异。 2左右心室不同部位起搏阈值在手术后各个时间点均有所变化，但与术前比较最高增幅尚未达到术前的2倍。 3心大静脉球囊组，在心大静脉阻塞1小时内，多次测定起搏阈值与阻塞前比较均无统计学差异，阻塞后各组比较，亦无统计学差异。心大静脉起搏心电图与起搏前心电图比较，无QRS电轴改变，QRS波群无增宽。 4对照组心脏远端、近端、对侧心肌细胞Cx43表达量无明显差别，形态学观察Cx43排列整齐、均匀分布于细胞侧面的闰盘处。心大静脉血栓后1周后，远端、近端心肌细胞Cx43表达量均减少，以远端心肌细胞Cx43表达量减少最明显，对侧心肌细胞无明显变化； 结论：阻塞心大静脉可导致起搏阈值增加，以阻塞邻近部位最明显，但是阈值增高程度不足基础值的2倍，随着时间的延长，阈值可下降。推测心大静脉阻塞不会造成严重的临床并发症。起搏阈值增加与心肌细胞Cx43表达减少呈一致关系。心大静脉内起搏不改变QRS电轴，QRS间期无延长，提示此部位在心脏多部位起搏中，可能是一较好的心室起搏位置。 第三部分心大静脉血栓后心脏结构功能及MMP-2、MMP-9的变化目的：了解心大静脉血栓后，心脏重构、超微结构和基质金属蛋白酶(MMP)在不同部位的表达。 方法：模型、分组、以及采取心肌标本部位与第二部分一致。心脏整体结构和功能由2维超声心动图检测，光镜和电镜观测心大静脉血栓后，不同时间、心脏不同部位超微结构变化。 结果：1心大静脉血栓后，阻塞血管远端心肌发生变化。光镜下以心肌纤维水肿为主要表现，电镜观察线粒体已发生较严重的改变。随着时间延长，病变减轻，3、4周时，心脏大体结构表现为血栓血管旁心肌结缔组织增多，局部弹性降低以及心肌扩张。 3超声心动图比较血栓后不同时间心室间隔厚度(ⅣVSd)、左室后壁厚度(LVPWd)、左室舒张内径(LVDd)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末容积指数(LVEDⅥ)等指标，发现上述指标在血栓前后以及血栓后各时间点之间，均未有统计学意义的改变。 结论：心大静脉血栓1周后，心肌细胞损伤最严重，以后逐渐减轻，MMP-2、MMP-9以不同方式影响心脏重构。心大静脉血栓1个月内，心脏整体功能未发现明显变化，心腔大小未见明显改变。 第四部分心大静脉血栓与心肌细胞凋亡及其调控目的：探讨心大静脉血栓后，心肌细胞凋亡以及凋亡调控基因bcl-2,Bax的作用。 结果：1对照组各个部位心肌细胞凋亡率极低。心大静脉血栓发生后，心肌细胞凋亡率明显增加，以对侧——左室后壁心肌细胞凋亡增加最明显，2周后凋亡率仍高于远端和近端；3周时，远端、近端心肌细胞凋亡率已降至对照组水平，对侧心肌细胞凋亡率与对照组比较仍具有统计学意义；4周后，上述三个部位心肌细胞凋亡率均降至对照组水平。 2凋亡调控基因Bcl-2在对照组不同心肌部位表达无差别。心大静脉血栓发生1周后，仅心大静脉血栓远端心肌Bc1-2表达明显降低，其余各部位与对照组比较无明显变化；2周后，远端心肌Bcl-2表达增加，与对照组比较已无统计学差异，对侧心肌细胞Bcl-2表达增加，与对照组比较达到统计学意义，并且持续至第四周。血管阻塞近端心肌在血栓发生后不同时间，Bcl-2表达无明显变化。 3凋亡调控基因Bax在对照组各个部位表达较低，血栓发生1周后，对侧、远端、近端心肌细胞Bax表达均明显升高，并持续至第3周，以远端、近端Bax表达增加明显。 4对照组Bcl-2/Bax比值无差异，心大静脉血栓1周后，bcl-2/Bax比值在远端、近端、对侧三个部位均降低，各部位之间无差别；2周后远端、近端仍然减低外，对侧bcl-2/Bax比值升至对照组水平，3周除远端与对照组比较有差别以外，其余部位Bcl-2/Bax比值恢复至对照组水平；4周后，各个部位bcl-2/Bax与对照组比较已无统计学差异。 结论：心大静脉血栓可促使心肌细胞发生凋亡，在距离血栓最远的对侧——左室后壁心肌细胞，凋亡率发生最高；心肌细胞损伤最严重的远端，在心大静脉血栓后，抗凋亡基因bcl-2表达明显减少，促凋亡基因Bax则表现为各个部位表达明显增加。心肌细胞凋亡在4周时趋于“停止”的原因不明。凋亡调控基因bcl-2，Bax在心大静脉血栓发展过程中，主要产生促进凋亡作用。 第五部分猪心大静脉血栓后凝血纤溶指标的变化目的：观察心大静脉血栓发生后，血浆vWF，TXB2，tPA，PAI-1以及血清ATⅢ浓度的变化，探讨上述指标在血栓过程中的作用。 结果：血浆vWF水平在心大静脉阻塞1小时后明显升高(p＜0.001)，2周后降至与术前水平。血浆TXB2在心大静脉阻塞后1小时升高达峰值，以后迅速下降，1周后与术前比较无差异。血浆tPA活性在血管阻塞1小时明显升高；2周后与术前比较仍然有差异(p＜0.05)； 结论：GCV血栓后，凝血、纤溶系统、血小板、血管内皮发生明显改变。血小板、血管内皮变化多发生在血栓形成的早期，抗凝和纤溶系统在血栓后主要产生抗栓作用。