壳聚糖薄膜培养对MSCs中IL-4和IL-10等表达的影响

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目的:探讨壳聚糖薄膜培养和常规平板培养对间充质干细胞(MSCs)抗炎相关基因IL-4和IL-10等表达的影响。方法:2017年5月份于武汉大学人民医院妇产科采集3例足月正常分娩产妇脐带标本,从脐带组织中分离原代MSCs,采用壳聚糖薄膜底物作为MSCs培养基底,将原代MSCs分别接种于壳聚糖薄膜和常规聚乙烯培养板,观察培养过程中细胞形态;72h后收集两组细胞分别采用Real-time PCR和Western blot、免疫荧光技术方法检测MSCs抗炎相关基因LIF、IL6ST、IL-10、TSG6、COX-2、STC-1、IL1RN、IL-4、IL-13 m RNA及其蛋白的表达。结果:与传统的二维贴壁培养方式比较,壳聚糖薄膜培养的MSCs悬浮生长,细胞体积明显偏小,能够聚集形成3D多细胞球体结构。壳聚糖薄膜培养的MSCs抗炎相关基因LIF、IL6ST、IL-10、TSG6、COX-2、STC-1、IL1RN、IL-4、IL-13m RNA及其蛋白的表达水平较常规培养组显著增加,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:与常规培养的MSCs比较,壳聚糖薄膜培养的MSCs能形成多细胞球体,3D球体中的抗炎相关基因m RNA及其蛋白表达显著提高。
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