HAG预激对髓系白血病细胞作用机制的研究

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目的:研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)和高三尖杉酯碱(HHT)对髓系白血病细胞株HL-60细胞的作用机制。 方法:将HL-60细胞分对照组、G-CSF(100μg/L)单独作用组,HHT单独(0.05mg/L)作用组,Ara-C(10mg/L)单独作用组,G-CSF联合HHT组,G-CSF联合Ara-C组,HHT联合Ara-C组,G-CSF、HHT、Ara-C三药联合组(HAG)进行加药培养后进行以下检测: 1.台盼蓝计数活细胞和形态学观察; 2.MTT法检测不同药物对HL-60细胞在12小时和24小时的抑制率; 3.流式细胞仪进行细胞周期分析,比较各组培养12小时及24小时后S期细胞的变化情况,同时检测SubG1期细胞变化,初步了解各组药物对诱导细胞凋亡的情况。 4.检测早期凋亡标记Annexin V,通过Annexin V/PI双染法,流式细胞特异检测早期凋亡情况。 5.流式细胞仪检测药物作用后细胞分化抗原CD11b和CD33表达的变化,明确各药物诱导细胞分化的情况。
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