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鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis,DVH)是鸭肝炎 A 病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)感染引起的一种传播迅速、接触传染性、高发病率高致死率急性传染病。一旦发病,损失巨大。本试验首先筛选出对DHV有抑制作用的单味中药成分,形成中药成分复方,并对其抗DVH作用进行体内外比较后筛选出作用较好的复方作为优选方,随之对优选方的药效和药理学作用进行了研究,以期研发出对DVH有良好效果的中药成分复方用于临床防控DVH。试验Ⅰ:抗DVH中药成分复方的筛选为研制抗鸭病毒性肝炎中药成分复方,本实验从淫羊蕾黄酮(Epimediumflavone,EF)、三七黄酮(Notoginsengflavone,NF)、野菊花黄S酮(Wild chrysanthemum flavone,WCF)、黄茶苷(Baicalin,BA)、槐子苷(Geniposide,GP)、地黄苷(Rehmannioside,RN)、地黄多糖(Radix Rehmaniae Preparate Polysaccharide,RRRP)、夏枯草黄酮(Selfheal flavonoids,SF)8种中药成分中筛选出体外有较好抗鸭肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)的单味中药成分,根据一定比列组成复方,并对比观察了复方体内外抗鸭肝炎病毒作用,以期筛选出具有较好抗DVH复方。结果显示各单味药物成分体外均有抗DHAV效果:NF>GP>BA>EF>RN>WCF>SF>RRRP。组成的 4 个复方 EF-NF-WCF-BA、EF-RRRP-WCF-BA、EF-RN-WCF-BA、EF-RRRP-RN-WCF-BA在体外均有较好的抗DHAV鸭胚肝细胞的效果;复方EF-RRRP-WCF-BA、EF-RN-WCF-BA在体内也表现较好的抗鸭病毒性肝炎作用。综合经济、药物资源和药效等因素,确定EF-RRRP-WCF-BA(暂定名藿菊双黄饮)为抗DVH中药成分复方优选方。试验Ⅱ:藿菊双黄饮对DVH的治疗作用本试验是为了进一步验证筛选出的优选方藿菊双黄饮对鸭病毒性肝炎的治疗作用。135只4日龄樱桃谷鸭随机平均分成3组(EF-RRRP-WCF-BA、VC、BC 组),EF-RRRP-WCF-BA、VC 组雏鸭肌肉注射 5 LD50DHAV,BC组注射同体积生理盐水。攻毒后1h复方组立即于饮水中混饮给予藿菊双黄饮,总质量浓度3 mg/只,每天1次,连续5 d。每组每时间段(攻毒后4 h、8 h、54 h)各采5只雏鸭的血液样本和血清样本。观察雏鸭动态死亡情况,并测定了血清肝损伤生化评价指标(ALP、AST、ALT等)、炎症因子(IL-6、IL-8、HGF)和血液中DHAV相对表达量。结果显示,藿菊双黄饮可以抑制相关肝损伤生化评价指标的异常变化,提高血清IL-6、HGF水平,降低攻毒后54h时血液DHAV相对表达量。表明藿菊双黄饮对DVH具有较确实的疗效。试验Ⅲ:藿菊双黄饮对人工诱发DVH雏鸭氧化损伤的保护作用为了进一步研究藿菊双黄饮抗DHAV作用,本试验观察了 DHAV攻毒后4h、8h、54h时雏鸭体内血清以及DHAV感染的体外鸭胚肝细胞上清中SOD、CAT、GSH-Px、NOS、MDA的变化(动物分组处理同试验Ⅱ)。结果显示藿菊双黄饮可以提高DHAV感染后雏鸭体内和鸭胚肝细胞上清中SOD、CAT、GSH-Px在体内体外的水平;降低NOS、MDA水平,且上述氧化损伤评价指标体内外变化趋势基本一致。表明藿菊双黄饮能够减轻由DHAV感染导致的雏鸭肝脏氧化损伤。试验Ⅳ:藿菊双黄饮对雏鸭免疫功能的调节作用为了观察免疫调节在藿菊双黄饮抗雏鸭病毒性肝炎过程中的作用,本试验测定了 DHAV攻毒后4 h、8 h、54 h各组雏鸭体内血清中与免疫相关的细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的变化(动物分组处理同试验Ⅱ),并观察了藿菊双黄饮对体外培养的鸭血液T淋巴细胞增殖的影响。结果显示,中药成分复方藿菊双黄饮可以提高DHAV攻毒雏鸭体内免疫相关细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ水平,具有一定的免疫增强作用。对体外培养的鸭T淋巴细胞转化有促进作用,提示藿菊双黄饮对DHAV感染雏鸭有免疫调节作用。