白皮锦鸡儿黄酮及其抗菌和抗氧化活性

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白皮锦鸡儿(Caragana leucophloea Pojark.)为豆科(Leguminosae)蝶形花亚科(Faboideae)山羊豆族(Galegeae)锦鸡儿属植物,主要分布在新疆、甘肃、内蒙古等地,具有丰富的营养价值,是荒漠牲畜骆驼和羊的牧草。本文主要对白皮锦鸡儿乙醇提取物及其不同溶剂萃取组分进行抗菌和抗氧化活性筛选,采用活性追踪分离的方法对乙酸乙酯萃取组分进行分离纯化,对分离到的化合物进行抗菌和抗氧化活性的测定,取得的结果如下:对白皮锦鸡儿的乙醇提取物、石油醚萃取组分、乙酸乙酯萃取组分、正丁醇萃取组分和水部分进行了抗真菌和抗氧化活性测定,结果表明白皮锦鸡儿乙醇提取物具有一定的抑菌作用,在各萃取组分中,乙酸乙酯萃取组分对供试病原真菌表现出较强的抑制作用,同时也表现出较强的抗氧化活性。采用三氯化铝显色法检测了白皮锦鸡儿提取物及不同极性萃取组分的黄酮含量,发现乙酸乙酯萃取组分黄酮含量较高,继而用高速逆流色谱进一步纯化黄酮,纯化后组分中黄酮含量是纯化前的5.26倍,表明使用该方法纯化黄酮具有一定的应用价值。在优化高速逆流色谱分离条件的基础上,获得一色谱峰,经鉴定为3-O-甲基山奈酚,纯度为96.78%。通过硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、结晶与重结晶等分离技术,从白皮锦鸡儿的活性部位乙酸乙酯萃取组分分离得到了3个化合物,并运用1H-NMR、13C-NMR等波谱技术对其进行了鉴定,其结构分别为:3-O-甲基山奈酚(3-O-methylkaempferol,1)、3-O-甲基槲皮素(3-O-methylquercetin,2)和槲皮素(quercetin,3)。以6种细菌、1种真菌为供试菌株,通过MTT-比色法和稻瘟菌孢子萌发法对白皮锦鸡儿各化合物进行了抗菌活性测定,结果表明化合物1、化合物2和化合物3对番茄青枯病菌具有很好的抑制作用,其最低抑制浓度分别为12.5μg/mL、25μg/mL和25μg/mL,其IC50分别为7.42μg/mL、12.10μg/mL和12.29μg/mL,化合物1对6种细菌的抑制活性明显好于化合物2和化合物3;化合物1、化合物2和化合物3对稻瘟菌孢子萌发也有一定的抑制作用,其IC50分别为56.56μg/mL、76.61μg/mL和49.8。采用DPPH清除率法和抑制β-胡萝卜素/亚油酸氧化法检测了白皮锦鸡儿各化合物的抗氧化活性,结果表明各化合物对DPPH和β-胡萝卜素/亚油酸均表现出一定的抗氧化能力,化合物3和化合物2表现出较好的抗氧化活性,对DPPH清除率的IC50分别为13.64μg/mL和14.3μg/mL;对抑制β-胡萝卜素/亚油酸氧化的IC50分别为9.87μg/mL和110.26μg/mL。本论文首次对白皮锦鸡儿抗菌活性成分进行了研究,化合物1、化合物2和化合物3系首次从白皮锦鸡儿中分离得到,同时对3个化合物进行了抗菌和抗氧化活性的测定。研究结果为阐明白皮锦鸡儿抗菌化合物和白皮锦鸡儿资源的开发利用提供依据。
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