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目的
通过实验观察不同灭菌负载在不同灭菌程序下的灭菌效果,研究灭菌不同负载的灭菌参数和影响因子;研究灭菌器排冷空气阶段是否有微生物排出,并通过现场调查了解实验室压力蒸汽灭菌器的使用现状,为制定实验室压力蒸汽灭菌器的标准提供基础资料。
方法
1.用下排气式压力蒸汽灭菌器和脉动真空式压力蒸汽灭菌器对实验前物品(固体和液体)进行实验,不同灭菌温度下(115℃、121℃、126℃、132℃、134℃)设定不同时间点,观察不同灭菌程序下负载的灭菌情况;用下排气式压力蒸汽灭菌器对实验室废弃物进行实验,在121℃设定不同时间点,观察不同灭菌程序下实验废弃物的灭菌情况。
2.将染有粘质沙雷氏菌和枯草杆菌黑色变种芽孢的载体分别放入下排气式压力蒸汽灭菌器和脉动真空式压力蒸汽灭菌器中,用Andersen六级采样器和AGI-10采样器采集灭菌循环前期阶段排出的柜室内冷空气,培养后观察是否采集到指示菌。
3.采用现场调查(包括资料调查和现场检测)的方法对某机构实验室压力蒸汽灭菌器进行调查。资料调查以调查表的形式获得,包括型号、规格、负载类型等内容;现场检测分为温度-时间测定、化学检测和生物检测三部分,并检查灭菌循环过程中气体和液体的排放情况。
结果
1.固体物品经115℃35min、121℃20min、126℃15min、132℃3min、134℃3min五种程序后均可达到灭菌;固体负载需合理放置,以利于内部冷空气的排出;若要求包装,则需用蒸汽能穿透的材料;液体物品经115℃30min或121℃15min后可达到灭菌。
2.压力蒸汽灭菌程序设定在121℃30min时可灭活10<8>cfu/ml嗜热脂肪杆菌芽孢液,灭菌时间延长到45min时方可灭活10<9>cfu/ml嗜热脂肪杆菌芽孢液。
3.当在载体上染15ml枯草杆菌黑色变种芽孢(1.5~1.58×10<10> cfu/ml)和100ml粘质沙雷氏菌(1.2~3.6×10<8>cfu/ml)时,下排气式压力蒸汽灭菌器和脉动真空式压力蒸汽灭菌器在灭菌排冷空气阶段均可采集到指示菌,显示排气口可排出微生物。
4.调查表明,该机构共有小型压力蒸汽灭菌器71台,其中灭菌温度合格率为60.56%;灭菌时间合格率为71.83%;化学指示卡和生物指示剂检测结果均合格;BSL-3实验室处理废弃物的压力蒸汽灭菌器排气口处装有气体过滤装置,其他实验室均直接将灭菌循环中的气体排入室内环境中。
结论
1.压力蒸汽灭菌器灭菌物品时,需根据负载类型的不同确定合适的灭菌程序,并重视灭菌负载的摆放和包装。
2.实验证明压力蒸汽灭菌器在灭菌循环前期的排冷空气或抽真空阶段,灭菌器内某些微生物可形成气溶胶,并随冷空气从排气管道排入环境。因此,用压力蒸汽灭菌器处理污染物时存在生物安全隐患,需对排气口处采取一定措施。
3.调查发现,该机构压力蒸汽灭菌器化学检测和生物检测均合格,灭菌温度和灭菌时间的检测有不合格现象,在灭菌设备的管理、灭菌人员的灭菌知识水平、灭菌程序的确定等方面仍然存在问题,需加强人员的培训和日常监测。