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背景:MicroRNA是一类内源性非编码单链RNA小分子,通过完全互补和不完全互补结合到靶基因mRNA上,降解mRNA或抑制蛋白质翻译。miR-100作为一个肿瘤抑制因子在多种肿瘤中表达下调,与肿瘤细胞增殖、转移和患者预后有密切关系。PLK1(polo-like kinasel)已被证实是miR-100的一个靶基因,它在多种肿瘤中特异性表达上调,对细胞有丝分裂至关重要,可能参与癌症的发生与发展。然而目前miR-100与PLK1在肝癌组织中表达的关联性及病理意义尚不十分清楚。目的:本研究分析miR-100及其靶基因PLK1在肝细胞癌患者肿瘤组织中的表达情况,探讨二者与肝细胞癌临床病理特征的关系。方法:1.采用LNA修饰、Cy3荧光标记的miR-100探针进行荧光原位杂交(FISH),检测肝细胞癌患者肿瘤组织中miR-100的表达,实验同步以正常肝组织作为对照。2.采用免疫组织化学方法检测肝细胞癌患者肿瘤组织中PLK1、PHH3蛋白的表达,同步以正常肝组织作为对照。结果:1. FISH检测miR-100在肝癌患者肿瘤组织的表达在10例人正常肝组织中miR-100表达均呈强阳性,荧光信号位于细胞浆。然而在29例肝癌组织中,18例为阴性,另有11例阳性表达,其中除2例为强阳性外,余下均为弱阳性。人正常肝组织miR-100表达阳性率显著高于肝癌组织(100%VS37.9%,P<0.01),说明miR-100在肝癌组织中表达减少。根据病理组织学观察,高、中分化组miR-100阳性表达率为56.25%,低分化组为15.38%,二者之间具有显著性差异(P<0.05),提示随着肿瘤分化程度的降低,miR-100的表达呈减少趋势。2.免疫组化检测PLK1、PHH3蛋白在肝癌患者肿瘤组织的表达在5例正常肝组织中PLK1无阳性表达,而在55例肝癌组织中有49例PLK1呈阳性表达,阳性率为89%,较正常组织显著升高(P<0.001)。进一步分析可见PLK1的表达与肝癌患者性别、年龄、乙肝、结节数目、有无远处转移和肿瘤分化程度均无明显关系。PHH3作为细胞有丝分裂特异标志物,在PLK1蛋白表达阳性的肝癌组织中PHH3阳性表达率为90%(44/49),但在PLK1表达阴性的肝癌组织中均无表达,PLK1与PHH3表达之间呈正相关(r=0.700;P<0.001)。说明PLK1与肝癌细胞的分裂增殖关系紧密。3.肝癌组织miR-100与靶基因PLK1表达的相关性分析miR-100表达阳性的肝癌组织中PLK1阳性表达率为45%(5/11),而miR-100表达阴性的肝癌组织中PLK1阳性表达率为100%(18/18),二者表达之间呈负相关(r=-0.653,P<0.001)。结论:1.在肝细胞癌组织中,miR-100表达明显下调,与PLK1异常表达密切相关。2.临床分子病理检测miR-100对判断肿瘤的分化程度具有一定价值;另外PLK1表达情况有助于判断肝癌细胞的恶性增生状态。