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肝癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一。药物治疗在肝癌的综合治疗中占有重要地位。经过几十年的发展，抗肝癌药物的研究近年已转向从天然先导化合物及其类似物中寻找针对新靶点，高效、低毒的新型抗癌药这一方向。本研究即为该领域的一项探索性研究。 本论文共分为四个部分。 在第一部分中，采用组织芯片和免疫组织化学技术检测了胎儿、成人多器官正常组织及肝癌组织中硒蛋白P的表达，分析了硒蛋白P与肝癌临床病理因素之间的关系，并从进化的、生理的和病理(癌变)的角度对硒蛋白P的生物学功能进行了全面的评估，由此提出硒蛋白P是一个非常有价值的、天然的抗肝癌药物的先导化合物。 在第二部分中，采用生物信息学技术分析、预测了硒蛋白P的结构域及其功能，发现硒蛋白P的N端结构域(SelP_N)具有保护细胞抗脂质过氧化损伤的功能，同时发现其中亦含有多个与第四军医大学博士学位论文细胞凋亡相关的motif，SelPN功能区(SelP137)中的see40th是决定SelPN最终功能的核心元件。 在第三部分中，设计了一个新的小分子细胞凋亡诱导剂—SelP137m(SelP137的突变体)。采用PCR介导的点突变法获得了SelP137m基因，并将其克隆到含绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP一C3中，脂质体法将PEGFP一C3一selP137m质粒转染人肝癌细胞BEL一7402，筛选出稳定克隆，进一步采用分子生物学和细胞生物学技术证实，selP 1 37m基因在肝癌细胞中可稳定表达，并诱导其凋亡。 在第四部分中，将Se1P 137m基因克隆到原核表达载体pET3oa中，将重组pET30a一selpl37m重组质粒转化基因表达工程菌E.Coli BL21，经IPTG诱导，由T7启动子调控表达梭基端带6个连续组氨酸残基(His)的SelP137m重组蛋白，金属鳌合亲和层析法纯化重组蛋白，采用膜生物学技术，在非细胞体系中证实，selP137m重组蛋白具有促进肝线粒体膜渗透性转运孔(MPT)开放、导致线粒体内膜跨膜电位崩溃的作用。 由此，我们获得了一个基于硒蛋白P多肤天然结构的、以线粒体MPT为靶点的小分子细胞凋亡诱导剂，同时还建立了一个针对作用机制的快速、稳定、便捷的先导化合物的筛选平台，为最终获得一种新的抗肝癌药物奠定了良好的工作基础。