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全雌系甜瓜在杂交种的配制中具有绝对优势,使用全雌系做母本可以降低人工成本并提高制种效率,这对于保证杂交种的纯度具有重要的意义。但是自交留种过程中,诱雄是制约制种的主要因素,尽管生产上可利用一些化学试剂诱雄,但是施用方式对诱雄效果影响不一。本研究以全雌系厚皮甜瓜WI998为材料,设计双因素试验探究诱雄效应,在瓜苗2叶1心期、3叶1心期、4叶1心期和5叶1心期分别采用外源喷施浓度为150、300、450、600mg/L的AgNO3,观察形态学、显微观察花芽分化情况、转录组测序分析差异表达基因,以及实时定量PCR等方法对全雌系甜瓜(WI998)产生雄蕊形成两性花的效应进行综合研究。结果如下:1.不同苗龄喷施AgNO3施用不同浓度对全雌系甜瓜两性花诱导的影响全雌系甜瓜WI998在不同苗龄(2叶、3叶、4叶、5叶1心)用不同浓度AgNO3(150、300、450、600mg/L)诱雄后产生雄蕊形成两性花,对各个处理的平均诱雄率、平均始花节位、平均末花节位和平均单株两性花数进行数据调查统计分析后得出诱雄后各处理两性花的分化情况,并分析了苗龄和AgNO3的施用浓度对全雌系甜瓜两性花分化的影响,结果表明:4叶1心期是全雌系甜瓜WI998诱雄的最佳时期;浓度450mg/L AgNO3为最适宜浓度。2.经AgNO3诱导产生的两性花与雌花的形态观察在不同苗龄(2叶、3叶、4叶、5叶1心)经不同浓度AgNO3(150、300、450、600mg/L)处理的全雌系甜瓜WI998得到的两性花相对于雌花可以很明显的看到诱雄后产生的雄蕊,并观察发现绝大多数雌花相较于两性花来说子房更加膨大。3.显微观察诱雄产生两性花花粉活力及花粉量鉴定用醋酸洋红染色法对在不同苗龄(2叶、3叶、4叶、5叶1心)经不同浓度AgNO3(150、300、450、600mg/L)诱导得到的两性花所产生的雄蕊花粉进行处理,各随机抽取三个视野进行显微观察,结果表明:4叶1心,用450mg/L AgNO3处理得到的有活力的花粉量最多,平均为210.33个;其次是2叶1心用450mg/L AgNO3处理得到的有活力的花粉量平均为102.67;5叶1心用450mg/L AgNO3处理得到的有活力的花粉量平均为87.67;3叶1心用600mg/L AgNO3处理得到的有活力的花粉量平均为78.33;而5叶1心用600mg/L AgNO3处理得到的有活力的花粉量最少,平均为15.33个。4.种子生活力的测定将在4叶1心用450mg/LAgNO3诱导获得的两性花自交,得到自交结实后的种子进行发芽率的测定,结果显示:发芽率可达到99%,种子的生活力较高。5.全雌系甜瓜经AgNO3处理和未处理对照的转录组学分析及qRT-PCR验证利用Illumina Hi Seq4000测序技术对经450mg/L AgNO3处理及未处理对照的全雌系甜瓜WI998所获的直径为2mm大小的花芽进行转录组测序,全雌系甜瓜WI998未经AgNO3处理的对照株2mm大小的花芽平均获得21,856,345 Clean reads,比对到参考基因组为41,339,275,占Clean reads 94.56%,比对到参考基因组唯一位置的Reads数目为40,881,088,占所有reads的93.52%,全雌系甜瓜WI998未经AgNO3处理的对照株2mm大小的花芽测序数据GC平均含量为43.87%;全雌系甜瓜WI998经450mg/L AgNO3处理所获2mm大小的花芽平均获得23,638,454 Clean reads,比对到参考基因组为44,370,008,占Clean reads93.85%,比对到参考基因组唯一位置的Reads数目为43,894,460,占所有reads的92.84%,全雌系甜瓜WI998经450mg/L AgNO3处理所获2mm大小的花芽测序数据GC平均含量为43.47%。对全雌系甜瓜4叶1心经450mg/L AgNO3处理和未处理对照(花芽直径为2mm)的差异表达基因进行了比较。共检测到差异表达基因17个,11个基因下调,6个基因上调。GO功能分类发现,其中有22条Unigenes归入到生物学过程,15条Unigenes归入到细胞学过程,15条Unigenes归入到分子功能。采用GO功能分类方法进行分析,把所有差异表达基因进行GO功能注释。从中筛选出13个基因,用于qRT-PCR分析。qRT-PCR分析结果与测序结果趋势大体一致,仅有基因MELO3C009337(probable aquaporin PIP2-4)的表达量差异较大。其中包含蛋白类相关的差异基因9个,包含酶类相关的差异基因4个。筛选到了一个差异基因MELO3C018449,注释为ABA 8’-羟化酶(CYP707A),为细胞色素CYP450基因超家族的成员,但它是否为决定全雌系转雄的关键基因还有待进一步试验证明;分析发现ABA合成途径与诱发雄蕊形成两性花相关。