麻疯树是一种重要的生物柴油树,近年来,随着对麻疯树研究的日益深化,如何对麻疯树资源进行综合利用,提高其经济效益成为研究热门。麻疯树中含有萜类、黄酮、脂肪、蛋白质、香豆素等多种成分,可被用于生物制药、抗菌、动物饲料、工业制皂等多种用途。佛波醇酯是麻疯树中一种重要的毒素成分,对人和动物有一定的刺激和毒性。一方面,佛波醇酯的存在大大限制了麻疯树在动物饲料、生物柴油等方面的应用,必须运用多种措施进行去除；另一方面,佛波醇酯对血吸虫的中间宿主钉螺有特异性的杀灭作用,可被用做生物农药。佛波醇酯在麻疯树中的生物合成途径目前还并未完全清楚,因此,本文选取麻疯树作为实验材料,克隆了佛波醇酯合成途径的相关关键酶基因,并对基因的表达和麻疯树佛波醇酯的含量进行了相关分析,希望能够通过基因工程的方法控制麻疯树中的佛波醇酯含量,为麻疯树的进一步应用打下基础。1)麻疯树法呢基焦磷酸合成酶基因(JcFPS)法呢基焦磷酸合成酶(FPS)的催化作用是萜类合成途径中关键的步骤。采用RACE的方法,从麻疯树中克隆了FPS基因(JcFPS),该基因与其他物种中的FPS基因具有较高的同源性。其cDNA全长为1471 bp,包括5’和3’非翻译区(UTR)、polyA尾和一个长1026 bp的开放阅读框(ORF)。JcFPS基因编码的蛋白质共有342个氨基酸,分子量为39.45 kDa,理论等电点5.39。2)麻疯树八氢番茄红素合成酶基因(JcPSY)八氢番茄红素合成酶(PSY)是类胡萝卜素合成途径中第一个关键酶。采用RACE的方法,从麻疯树中克隆了PSY基因(JcPSY),该基因与其他物种中的PSY基因具有较高的同源性。其cDNA全长为1755 bp,包括5’和3’非翻译区(UTR)、polyA尾和一个长1287 bp的开放阅读框(ORF)。JcPSY基因编码的蛋白质共有429个氨基酸,分子量为48.07 kDa,理论等电点8.95。3)麻疯树鲨烯合酶基因(JcSQS)鲨烯合酶(SQS)是甾醇合成途径中第一个关键酶,也是该途径最关键的酶。采用RACE的方法,从麻疯树中克隆了SQS基因(JcSQS),该基因与其他物种中的SQS基因具有较高的同源性。其cDNA全长为1630 bp,包括5’和3’非翻译区(UTR)、polyA尾和一个长1239 bp的开放阅读框(ORF)。JcSQS基因编码的蛋白质共有413个氨基酸,分子量为47.24 kDa,理论等电点7.16。