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集胞藻(Synechocystis sp.PCC6803)在培养过程中向培养基中分泌大量胞外多糖。经过两个月的培养,集胞藻培养液经过离心、浓缩、乙醇沉淀、透析等步骤后,冻干得到胞外多糖(S-EPS)。粗胞外多糖经过阴离子交换柱DEAE-Sephacel纯化,沈脱曲线出现一个窄的单峰。气相色谱表明,S-EPS中性单糖组成为鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为0.4:1.2:1.4:3.0:13.2:2.2。高效液相色谱证实S-EPS同时含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。粗多糖含有66.8%和16.5%碳水化合物和蛋白质,以及1.89%的硫酸基团,其中糖醛酸含量占总糖的10.4%;纯多糖含有70.7%和19.1%的碳水化合物和蛋白质,以及2.02%的硫酸基团,其中糖醛酸含量占总糖的13.1%。
使用HAAKE公司RheoStress600流变仪进行的流变学研究表明,集胞藻胞外多糖水溶液呈现典型的假塑性行为,随剪切速率增加出现剪切变稀现象。其零切粘度的临界浓度为0.52 mg/ml。胞外多糖粘度值接近黄原胶,当剪切速率在0.15s-1时,两者粘度相等。胞外多糖的0.1 mol/L氯化钠溶液和水溶液的流动曲线非常相似,另外在30℃到70℃温度范围内集胞藻胞外多糖粘度值具有一定的稳定性,70℃时溶液的粘度是30℃时的90%。集胞藻胞外多糖的粘弹谱类似于黄原胶,具有弱凝胶的特性,较低浓度时(3 mg/ml)储能模量G’在粘弹谱检测全频率范围内总是大于损耗模量G”。
集胞藻胞外多糖具有较好的乳化能力,并且表现出浓度依赖性,当多糖浓度达到1.5 mg/ml时能使橄榄油完全乳化。使用1.5 mg/ml的多糖溶液和一系列食用油及碳氢化合物混合搅匀,结果表明S-EPS对植物油,正十六烷,石蜡,二甲苯和2-甲基萘+正十六烷(1:1)都有良好的乳化作用。得到的乳液经过一个月时间的静置,没有出现明显分层现象,表现出较好的稳定性。集胞藻胞外多糖可以作为增稠剂、稳定剂以及乳化剂应用于食品、化妆品工业等领域。
外源性的H2O2极易通过细胞膜而进入细胞内,进一步生成各种活性氧,造成细胞损伤,通过比较预先加入多糖的实验组和损伤组中PC12细胞的存活率,可以分析胞外多糖的体外抗氧化活性。实验表明,在加入S-EPS溶液预处理后,细胞的存活率有很大的提升,S-EPS对H2O2导致的氧化损伤具有较好的保护作用,并且显示剂量依赖性,在S-EPS浓度达到200μg/ml时细胞存活率为71%,超过了正对照1mM维生素E69%的保护效果。过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶的活力在S-EPS的保护下比损伤组分别上升了34%和53%,而细胞损伤的指标乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)含量分别下降了64%和30%。集胞藻胞外多糖表现出很好的抗氧化能力,具有作为天然抗氧化剂的应用潜力。