论文部分内容阅读
研究背景：阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病,临床上以进行性认知功能障碍为主要表现。其典型病理特征为β淀粉样蛋白(beta amyloid, Aβ)聚集形成的老年斑(Senile plaque, SP),神经纤维缠结(neurofibrillary tangle, NFT)以及神经元死亡。Ap级联反应学说是目前公认的AD发病机制之一,越来越多的研究发现Aβ所诱导的炎症反应在AD的发病过程中发挥关键作用。目的：1)体内外AD模型评价羟基红花黄色素A(hydroxy-safflor yellow A, HSYA)对Aβ1-42诱导的炎症反应的抑制作用；2)探讨其抑制炎症反应的可能机制。方法：采用小鼠海马立体定位注射Aβ1-42的方法建立体内AD模型。Aβ1-42处理小鼠BV-2小胶质细胞建立体外模型。体内外均随机建立AD组及HSYA治疗组。MTT及LDH方法检测HSYA对Ap1-42处理BV-2小胶质细胞活力的影响；水迷宫试验评定HSYA对小鼠学习、记忆障碍的改善情况；免疫荧光染色观察HSYA对小胶质细胞和星形胶质细胞活化状态的影响;Real-time PCR及western blot检测炎症因子的表达；western blot检测HSYA对JAK2-STAT3及NF-κB通路活性的影响；MTT及流式细胞术(flow cytometry, FCM)测定不同条件培养基对细胞活力和凋亡率的影响。结果：MTT及LDH结果表明HSYA减轻Aβ1-42的神经毒性；水迷宫试验结果显示HSYA明显缩短了小鼠找到平台的潜伏期以及上台前路程,同时增加其穿过平台的次数；免疫荧光结果提示HSYA显著抑制Aβ1-42诱导的小胶质细胞和星形胶质细胞的激活；Real-time PCR及western blot结果提示HSYA抑制Aβ1-42诱导的促炎性细胞因子的表达,上调抑炎性细胞因子的表达。HSYA显著上调JAK2-STAT3通路的活性,抑制NF-κB通路的活性。特异性抑制JAK2-STAT3通路的活性则部分抑制了HSYA的抗炎作用,同时也阻断了HSYA对NF-κB通路的抑制作用。结论：炎症反应在AD的发病机制中发挥重要作用,HSYA能够抑制Aβ1-42诱导的炎症反应,发挥神经保护作用,提高AD小鼠的学习记忆能力；其抗炎机制可能由JAK2-STAT3-NF-KB通路介导。HSYA在AD的防治中具有潜在的应用价值。