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目的:抑郁症是一种以情绪低落为主并伴有自杀倾向的情感障碍性疾病,有研究发现PDE4抑制剂可通过上调cAMP水平发挥抗抑郁样作用,第一代PDE4抑制剂咯利普兰在基础研究和临床Ⅱ期试验中均表现良好的抗抑郁作用,然而由于致呕反应无法上市。因此,通过结构改造合成化合物FCPR16,前期已证实其在比格犬实验中具有较低的致呕潜能。本课题将利用小鼠行为绝望模型和慢性不可预知性温和应激模型(chronic unpredictable mild stress,CUMS)对FCPR16的抗抑郁作用进行评价,并研究其可能涉及的作用机制。方法:(1)以行为绝望模型对FCPR16进行初步评价。单次给予FCPR16(0.35、0.7、1.4、2.8 mg/kg,i.g.)45 min 后,进行旷场实验(open field test,OFT)、悬尾实验(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST)。(2)以CUMS模型对FCPR16的药效学作进一步的验证。CUMS造模6周后以TST和FST剔除造模失败的小鼠,FCPR16(1.5mg/kg,i.g.qd.)给药3周,以Escitalopram(10 mg/kg,i.g.qd.)作阳性对照,给药过程保持应激,第9周进行TST、FST、糖水偏爱实验(sucrose preference test,SPT)和新奇抑制摄食实验(novelty-suppressed feeding test,NSFT)。(3)收集生物样本:①ELISA法测皮层及海马中cAMP与炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)水平;② Western blot 法测皮层及海马中 CREB、p-CREB、BDNF、ERK1/2、p-ERK1/2、EPAC-2、synapsin1、PSD95 及海马中神经元前体细胞标记物(doublecortin,DCX)的表达;③RT-PCR法测皮层及海马中小胶质细胞M1(TNF-α、iNOS)与M2(CD206、Arg1)表型标记物的mRNA水平;④免疫荧光法测皮层及海马中Iba1和CD206的表达,检测海马中DCX的表达。(4)BV-2细胞炎症模型:浓度梯度的FCPR16预处理后,LPS作用24 h,以ELISA检测细胞上清中TNF-α的分泌水平;BV-2细胞的表型转换模型:FCPR16与IL-4共同作用后,LPS刺激24 h,检测M1(iNOS)和M2(Arg1、Ym1)标记物的mRNA水平。结果:(1)在行为绝望模型中,各组小鼠在OFT中的水平得分与垂直得分无统计学差异,1.4 mg/kg和2.8 mg/kg FCPR16可显著降低TST及FST中的不动时间。(2)与CUMS组相比,1.5 mg/kg FCPR16可降低小鼠在TST和FST中的不动时间,升高在SPT中的糖水偏爱度,减少在NSFT中的潜伏期。(3)与CUMS组相比,FCPR16组皮层及海马中cAMP、BDNF、EPAC-2、p-CREB、synapsin1和PSD95的表达水平显著升高;TNF-α、IL-1β和IL-6的表达下降,IL-10的表达水平升高;TNF-α和iNOS的mRNA水平显著降低,Arg1和CD206的mRNA水平显著上升;CD206+细胞数及海马中DCX+细胞数增加;(4)FCPR16可减少LPS激活的BV-2细胞TNF-α的释放;降低iNOS和升高Arg1及Ym1的mRNA水平。结论:FCPR16可逆转小鼠在行为绝望模型和CUMS模型中的抑郁样行为,其可能与上调cAMP/CREB/BDNF与cAMP/EPAC-2通路通路,抑制炎症因子的分泌,加强小胶质细胞从M1至M2型的转换,改善突触及神经再生有关。