猪抵抗素、脂联素和脂联素受体基因的克隆和分子特征

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脂肪组织不仅是储藏及供给能量的场所,而且还是一个代谢十分活跃,功能复杂的内分泌器官,它能分泌许多脂肪细胞因子(Adipocytokines),包括肿瘤坏死因子—α(tumor necrosis factor—α,TNFα)、瘦素(leptin)、白介素—6(interleukin—6,IL-6)、脂联素(adiponectin)和抵抗素(resistin)等。这些脂肪细胞因子通过内分泌或旁分泌方式对全身各器官系统功能具有重要调节作用,特别是参与调节与肥胖相关的胰岛素抵抗和葡萄糖代谢紊乱。胰岛素抵抗也即胰岛素生理作用减弱,是多数2型糖尿病的主要的病理生理缺陷,往往与肥胖密切相关。 抵抗素(resistin)和脂联素(adiponectin)是近来发现的两个最为典型的脂肪细胞因子。Resistin的重要生理作用就是将肥胖与胰岛素抵抗联系起来。对resistin进一步深入研究对于预防、检测和治疗2型糖尿病具有重要指导意义。Adiponectin由脂肪细胞分泌后进入血液,以多种形式在血液中循环。脂联素球状区在体内独立存在,与完整的脂联素功能相似。脂联素能够促进肌肉脂肪酸氧化、降低血浆甘油三酯、通过增强胰岛素的敏感性而促进葡萄糖代谢。另外,脂联素在抗心血管疾病方面也发挥着重要作用。 本文以梅山猪为研究对象,以半定量RT-PCR、Western Bloting和辐射杂种细胞板技术等方法,对抵抗素、脂联素以及脂联素受体进行了基因克隆、表达及染色体定位等研究,取得了如下结果: 1.利用cDNA末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)的方法得到了猪resistin cDNA的5’和3’末端,通过拼接得到全长535bp的resistin cDNA序列;利用PCR的方法得到了resistin的全长DNA序列,并对其基因组结构进行分析。结果显示猪resistin cDNA序列含330bp的开放阅读框,编码109aa,分子量为12kDa,推导的氨基酸序列与人resistin氨基酸序列具有75.2%的同源性。猪resistin基因由四个外显子组成,与人resistin基因具有相同的外显子结构,而与小鼠resistin基因结构差异较大。
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