L-半胱氨酸荧光化学传感器的研制及应用研究

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L-半胱氨酸是一种很重要的含巯基的α-氨基酸,在生物体内发挥着许多重要的作用,如参与蛋白质合成、解毒、新陈代谢等。在人体的许多蛋白质中都可以发现L-半胱氨酸的存在,是生物相关蛋白质最重要的组成成分之一。L-半胱氨酸还有助于维持细胞内氧化还原活性、信号传导和基因调节。若细胞中L-半胱氨酸的含量偏离正常水平会导致很多疾病,危害人体的健康。同时,L-半胱氨酸还广泛应用于食品工业、生物医药、生化研究等领域。因此,建立一种简便的、具有良好选择性的L-半胱氨酸检测方法是一项很有意义的工作。荧光化学传感器具有操作简单、灵敏度高、选择性好、响应时间短、还可以进行实时检测等优点,已被广泛应用于环境、食品和生物体内痕量样品的检测。本论文设计并合成了2,2’-([1,1’-联苯]-2,2’-二基双(氧基))双(N-(喹啉-8-基)乙酰胺)(简称L)作为配体,将其与Cu2+的络合物L-Cu2+作为荧光探针检测L-半胱氨酸的含量,并对该探针的荧光光谱性质、识别性能、传感机理以及在实际样品中的测试效果进行了系统的研究。第一章中,对L-半胱氨酸进行了概述,包括L-半胱氨酸的重要作用以及会产生的一些危害,详细介绍了L-半胱氨酸的检测方法及其荧光化学传感器的研究进展。第二章中,主要介绍了配体L及其中间产物的合成方法,并通过质谱、核磁氢谱和碳谱对其进行了表征。第三章中,对荧光化学传感器L-Cu2+对L-半胱氨酸的检测性能进行了系统的研究,优化了实验条件,考察了传感器的选择性及抗干扰能力,对其传感机理进行了讨论,并将其应用于实际样品中L-半胱氨酸的定量测定。在常温下,PBS缓冲溶液(PBS 0.02 mol/L;p H=8.0)与乙腈体积比为9:1的溶液中,L-Cu2+对L-半胱氨酸识别的线性范围为1.0×10-6到8.0×10-6 mol/L,检出限可达到1.92×10-7mol/L。该传感器显示出对L-半胱氨酸良好的选择性及对其它共存氨基酸良好的抗干扰能力。通过络合工作曲线图及质谱分析提出了可能的传感机制。此方法在实际样品中检测L-半胱氨酸的加标回收率在99.2–102.1%之间,加标回收标准偏差在0.94%到1.52%之间,验证了其实用性。
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