二苯并噻吩脱硫菌的筛选及脱硫特性研究

来源 :中国石油大学(华东) | 被引量 : 0次 | 上传用户:w313296304
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二苯并噻吩及其衍生物是高硫原油的重要组成,它的存在不仅降低了原油品质,而且燃烧时排放二氧化硫,二氧化硫进入到外环境会造成环境质量的严重下降,并潜在威胁着生态系统及人体健康。本文以二苯并噻吩(DBT)作为模型化合物,从长期被石油污染的土壤中分离出专一性脱硫菌AS-21,采用16SrDNA序列法对菌株进行了鉴定,并对AS-21的培养条件和脱硫条件进行了优化;在此基础上,将AS-21接种到原油采出液中,考察该AS-21的脱硫效果;最后将AS-21制成休止细胞,考察不同浓度休止细胞的脱硫效果。本论文从不同油田区采集受污染的土样,进行初筛、复筛、分离纯化,得到两株脱硫菌AS-21和AS-26。该两株菌培养三天后,脱硫率分别达到73%和69%;脱硫菌AS-21为革兰氏阴性菌,且菌体为短杆形,对该菌株进行DNA提取,并经PCR扩增后测序,利用Blast程序将该菌的16SrDNA序列分析结果与GenBank中数据进行比对,比对结果显示该AS-21脱硫菌与红假单胞菌属Rhodopseudomonas 16SrDNA序列同源性最高,达到99%,故将AS-21初步鉴定为红假单胞菌属;通过对单因素影响研究和分析,得到菌株AS-21的最优培养条件和脱硫条件:培养温度为30℃,培养基初始pH为7.5,碳源为10g/L的甘油,氮源为2g/L的氯化铵,初始DBT浓度为100mg/L;通过响应曲面法研究确定生长温度为29.70℃,pH为7.43,DBT浓度为105.47mg/L时可得到最大脱硫率74%及最大菌株生长量2.49g/L;AS-21对采出液中所投放的DBT的脱硫实验结果表明,当向采出液中加入一系列营养物质后,脱硫率最高可为18.38%,由AS-21的生长曲线可知,0~15h为AS-21的生长停滞期,15~50h为AS-21的生长对数期,此后其生长进入稳定期,将对数末期的菌液制成休止细胞,对休止细胞脱硫效果进行考察,其脱硫率可达81%,高于普通菌株。
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