超猝灭核酸荧光探针应用研究

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目的:传统用于定量检测的核酸荧光探针通常荧光背景高,信背比低,以此建立的分析方法检出限较高,无法满足人们对于痕量物质进行定量测定的需求。基于此,本研究针对不同类别的目标物,设计了一系列的超猝灭核酸荧光探针,用于不同目标物高灵敏、低浓度的定量检测。方法:分别利用双重猝灭分子信标和核酸染料、氧化石墨烯和不同荧光染料标记的3种金属离子(Hg2+、Pb2+和Ag+)核酸适配体、双金属有机框架材料Cu/UiO-66和荧光染料标记的氯霉素核酸适配体,构建了3种不同类别的荧光探针;利用这3种不同的荧光探针建立了3种不同类别物质的定量检测新方法。结果:利用双重猝灭分子信标及核酸染料Hoechst 33258所构建的荧光探针实现了复杂样品(血清)中单链DNA的高灵敏双色定量检测;利用3种荧光标记的金属离子核酸适配体和氧化石墨烯构建的荧光探针实现了对土壤样品中Hg2+、Pb2+和Ag+的一步同时定量检测;利用荧光标记的氯霉素核酸适配体及双金属有机骨架材料Cu/UiO-66构建的荧光探针实现了鱼肉样品中氯霉素的高灵敏、高选择的定量检测。结论:本文根据不同类别的超猝灭荧光探针,分别建立了复杂样品(血清)中单链DNA的双色定量检测、土壤样品中Hg2+、Pb2+和Ag+的一步同时定量检测及鱼肉样品中氯霉素的定量检测3种新方法。这些方法荧光背景低、灵敏度高,选择性好,检出限低。本文提出的三种定量检测方法所使用材料均环保无毒,并且细胞亲和性高,在细胞检测方面也有潜在的应用价值。
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