【摘 要】
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本研究用标准AIV H9N2亚型毒株接种SPF鸡胚，收获尿囊液。经过差速离心，进行蔗糖密度梯度超速离心。根据流感病毒的浮密度(g/cm3)范围(1.19～1.25)，确定蔗糖的密度梯度为30～60﹪。根据
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本研究用标准AIV H9N2亚型毒株接种SPF鸡胚，收获尿囊液。经过差速离心，进行蔗糖密度梯度超速离心。根据流感病毒的浮密度(g/cm3)范围(1.19～1.25)，确定蔗糖的密度梯度为30～60﹪。根据AIV的直径范围(80～120nm，平均为100nm)，确定离心转速为30000r/min，离心时间3h。再经过透析后，用分光光度法测定其病毒含量为1.638mg/mL。本研究采用兔抗AIV血清IgG作为包被抗原，以间接ELISA法检测杂交瘤细胞培养上清液，筛选到分泌抗鸡和兔共有独特型表位抗体的融合细胞，从而获得分泌目的单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经过预试验，表明最适抗原包被量为102μg/mL。采用间接ELISA检测法，筛选获得3株(2E6H1、2E6G4、3E3D7)分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。3株融合细胞培养上清液中的单克隆抗体效价均为2-4，小鼠腹水中的单抗效价是1：3200。经检测表明，三株细胞系产生的单克隆抗体仅与相应的鸡抗H9N2亚型AIV血清发生特异性反应。
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