哺乳动物FOXL2（forkhead transcription factor gene2）在卵巢分化和卵巢功能维持上具有重要的作用。FOXL2是鸡卵巢分化的重要候选基因，但目前其功能还不清楚。为了探讨FOXL2在鸡性腺分化过程中的功能，本研究通过构建FOXL2慢病毒过表达载体并在DF1细胞系验证其功能;通过胚盘下腔注射鸡胚，探讨FOXL2对鸡胚性腺分化的影响;通过睾丸注射，探讨FOXL2对成年鸡性腺功能维持的影响。本研究得出如下结果:　　(1)成功克隆了广西麻鸡FOXL2基因CDS全长序列，共918bp，将测序结果与GenBank上鸡参考序列(NM_001012612.1)相比，同源性99.7％，存在三处碱基突变，分别是T226C，C501T和T690C。物种间同源性比较结果显示，广西麻鸡FOXL2基因CDS区序列与猪，鼠和人的同源性分别为80.5％，80.3％和80.1％。进化树分析显示，广西麻鸡与人的亲缘关系最远，与鼠的亲缘关系最近。　　(2)用BamHⅠ和EcoRⅠ同时双酶切pMD-FOXL2克隆质粒和pLV慢病毒空质粒，然后连接转化到Trans5α感受态细胞中，经菌液PCR、双酶切和测序鉴定，成功获得了pLV-FOXL2慢病毒过表达质粒。利用脂质体转染法，将pLV-FOXL2重组质粒转入鸡DF1细胞系，在倒置荧光显微镜下，观察到转染pLV-FOXL2重组质粒后，DF1能检测到绿色荧光蛋白的表达，说明构建的pLV-FOXL2慢病毒过表达质粒具有表达活性。QRT-PCR检测其FOXL2的过表达效率，结果表明FOXL2的过表达效率与对照差异极显著。　　(3)将pLV-FOXL2质粒和pLV空质粒与脂质体混合，制作质粒-脂质体复合物，通过胚盘下腔注射法将复合物注入孵化到第2天的鸡胚，孵化到16.5天，在体视显微镜下观察性腺的表型变化，收集性腺组织用作后续的实时荧光定量(qPCR)，组织切片和免疫组化分析，采集肌肉组织分别用于遗传性别鉴定和阳性个体鉴定。结果显示，pLV-FOXL2组共注射260枚，存活41枚，存活率为15.8％，其中遗传性别为公的23只，遗传性别为母的18只，表型性别为公的21只，表型性别为母的18只，其中有2只的表型性别不典型，左侧性腺膨大变黄类似卵巢结构。pLV组共注射100枚，存活21枚，存活率为21.0％，遗传性别为公的9只，遗传性别为母的12只，表型性别与遗传性别一致。阳性个体鉴定结果示显，pLV-FOXL2组有10只可检测到GFP，阳性率为24.4％;pLV组有8只可检测到GFP，阳性率为38.1％。　　(4)鸡胚性腺HE染色的结果显示，pLV-FOXL2组和pLV组公鸡睾丸的组织结构相似，与正常母鸡卵巢结构不同。免疫组化的结果显示CYP19A1蛋白在pLV-FOXL2组左右侧睾丸中的表达量与pLV组左右侧睾丸和正常母鸡卵巢相当;FOXL2蛋白在pLV-FOXL2组左右侧睾丸中的表达量高于pLV组左右睾丸，与正常母鸡卵巢中的表达相似。性别相关基因的qPCR结果显示，在pLV-FOXL2组中，AMH和CYP19A1的表达量显著下调(P＜0.05)，而SOX9的表达量显著上调(P＜0.05)。本试验说明，胚胎期FOXL2可能通过下调AMH抑制睾丸发育，使曲精细管壁变厚，结缔组织增生。　　(5)将pLV-FOXL2和pLV质粒-脂质体复合物，通过睾丸直接注射法从左侧睾丸注入13周龄公鸡睾丸中，20天后，观察公鸡鸡冠颜色，检测两侧睾丸的解剖学结构，组织学结构，免疫组化和性别相关基因的相对表达情况。结果显示，与pLV组相比，pLV-FOXL2组公鸡鸡冠的颜色明显变白;pLV-FOXL2组左右测睾丸曲精细管变小，曲精管上皮变厚，精子生成出现障碍;免疫组化的结果显示，与pLV组比，pLV-FOXL2组睾丸FOXL2和CYP19A1的表达量增加;性别相关基因的表达结果示显，在pLV-FOXL2组中，FOXL2和CYP19A1基因的表达量均显著高于pLV组(P＜0.05)。本试验说明，FOXL2可通过调控CYP19A1的表达来维持睾丸的功能。　　本研究的结果提示，FOXL2可通调节AMH和CYP19A1基因的表达调节鸡胚性腺的发育，与CYP19A1协同作用维持成年性腺的功能。