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目的: 探讨白介素27(Interleukin27,IL-27)在脓毒症诱导的心肌功能障碍(sepsis-induced myocardial dysfunction,SIMD)中的作用。 方法: 收集入住重庆医科大学附属第一医院重症医学科的SIMD病人20例(2014.10-2015.3),临床检验中心提供的正常对照组24例。对全部入选的病人及健康志愿者的姓名、住院号、年龄、性别、体温、脉搏、血压、呼吸频率、APACHEⅡ评分、原发疾病、反映各个脏器功能的生化和检测指标、PCT、PiCCO指标和心肌酶谱等进行资料收集。对收集的指标进行分析和检测血浆中 IL-27的表达,并对 IL-27和APACHEⅡ评分做相关性分析。 野生型雄性C57BL/6J小鼠20只,随机分为2组:空白对照组(Con组,N=5)、LPS组(LPS组,N=15);基因敲除IL-27受体雄性C57BL/6J小鼠(IL-27R-/-组,N=15)。LPS组及IL-27R-/-组腹腔注射LPS10 mg/kg构建小鼠脓毒症模型,Con组给予相同剂量 PBS。LPS组及 IL-27R-/-组分别于给药后6、12、24h进行观察、取材,每个时间点5只小鼠。光镜及电镜观察心肌病理组织学及超微结构变化;RT-PCR检测心肌组织IL-27的表达;免疫组化定位IL-27在心肌组织中的表达;ELISA法检测小鼠血清中 IL-27、cTnI、BNP、IL-6、IL-12、TGF-β及 TNF-α的表达。 结果: 1.SIMD患者组与健康对照组相比,除性别没有显著差异外,其他指标均有显著性差异,体温均值虽无差异,但变异度明显高于正常组。 2.SIMD患者的PiCCO指标显示:患者早期出现心肌收缩力减弱、容量前负荷降低、容量后负荷增加、肺水肿情况加重。SIMD患者的降钙素原和心肌酶谱表达显著升高。 3.SIMD患者与健康对照组血清IL-27浓度比较表达增加,且SIMD患者血清IL-27与APACHEⅡ评分之间存在良好的相关性。 4.小鼠腹腔注射 LPS后出现少动、体温降低、精神萎靡、眼部脓性分泌物增多、毛发直立、进食减少、腹泻等症状。 5.光镜活检心肌组织证实LPS诱导的心肌组织早期发生凝固性坏死、核碎裂、消失,胞质均质红染或呈不规则粗颗粒状、间质血管充血、红细胞外渗、组织水肿及局灶性心肌坏死和中性粒细胞浸润等。电镜示小鼠心肌部分肌丝溶解,细胞核肿胀,核周间隙增宽,线粒体排列紊乱、肿胀和空泡化,线粒体嵴部分断裂甚至溶解。 6.小鼠心肌免疫组化示 IL-27随时间推移,在心肌细胞表达阳性率增加,阳性信号定位于心肌细胞的细胞质。 7.ELISA检测脓毒症小鼠血清IL-27表达增加,且在12h表达最高。 8.RT-PCR示脓毒症小鼠心肌组织IL-27 mRNA表达增加。 9.ELISA检测心肌损伤标志物BNP和cTnI示,与Con组小鼠相比,经LPS刺激后的野生型和IL-27R-/-小鼠心肌损伤标志物BNP和cTnI都显著升高,且IL-27R-/-小鼠BNP和cTnI表达都显著高于野生型小鼠。 10.ELISA检测炎症因子TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12的表达示,与Con组小鼠相比,经LPS刺激后的野生型和IL-27R-/-小鼠TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12都显著升高,且IL-27R-/-小鼠TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12表达都显著高于野生型小鼠。 结论: 脓毒症患者机体遭受各种感染时激活机体免疫炎症系统,导致全身炎症反应,其通过多种途径导致患者心肌功能障碍。SIMD患者基本生命体征、肝、肾功能、感染指标及心肌酶谱等较正常健康组表达均异常,提示SIMD病人存在严重的炎症反应和明显的心肌损害。 PiCCO监测在评估SIMD的发生发展和指导临床治疗具有一定优势,能在早期对SIMD血流动力学的异常提供诊断依据,PiCCO联合心肌损伤标志物有助于SIMD的早期诊断。 SIMD病人血清中IL-27表达显著增加,且IL-27的浓度与病人的APACHEⅡ评分具有良好的相关性,IL-27与心肌功能障碍的相关性为实验室基础研究提供临床资料支持。LPS构造 SIMD模型心肌损害表现明显,且小鼠血清及心肌中 IL-27表达都显著增加。提示 IL-27在SIMD的发生发展中发挥着作用。进一步通过IL-27R-/-小鼠研究发现, IL-27R-/-的SIMD小鼠炎症反应增加,提示IL-27在SIMD的发生发展中起到保护性作用。