脉络膜新生血管的实验研究

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目的:采用眼底荧光素血管造影术(fundus fluorescein angiogrphy,FFA)和光学相干断层成像术(optical coherence tomography,0CT)观察532nm半导体激光诱导棕色挪威(brown norway,BN)大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型的可行性及奥曲肽和奥曲肽联合经瞳孔温热疗法(transpupillary thermotherapy,TTT)对实验性CNV的抑制作用。方法:采用半导体激光建立实验鼠眼CNV模型。选取10只BN大鼠氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉后,围绕视盘距视盘1~1.5PD击射10个点,激光功率150mW,光斑直径75μm,曝光时间0.1s。于光凝后7、14、21和28d随机选取5只采用腹腔注射20%荧光素钠0.5ml/kg后行FFA和OCT检查观察CNV的形成和变化,按FFA时间分为早期(<2min)和晚期(>10min),记录荧光渗漏斑数/渗漏面积(mm~2)的变化。选取20只造模成功后BN大鼠随机分组,空白对照组5只,治疗组15只按治疗方法不同分为1组、2组和3组:1组和2组为药物组,1组光凝当天开始用药,2组光凝后14d开始用药;3组为药物联合TTT组,光凝后14d开始用药联合TTT。治疗方法:奥曲肽50μg/kg球后注射,每周1次,连续2次;TTT治疗参数:功率56~76mW,光斑0.4~0.54mm,照射时间60s,1次。分别于光凝后7、14、21和28d采用FFA和OCT检查观察CNV的变化,记录FFA晚期(>10min)荧光渗漏斑数/渗漏面积(mm~2)的变化,将荧光渗漏按强度分级。应用SPSS12.0软件对所得数据组间差异用单因素方差分析,数据间两两比较用LSD检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.BN大鼠CNV模型制作1.1光凝后7d光凝区显示不规则的荧光渗漏,14d渗漏增加,21d渗漏达高峰,28d渗漏斑面积增大,光凝后7、14、21和28d CNV的成模率分别为36%、55%、69%和70%;早期荧光渗漏斑数/渗漏面积在光凝后14、21和28d经两两比较差异无统计学意义(P>0.05),14、21和28d与7d相比差异有统计学意义(P>0.05);晚期荧光渗漏斑数/渗漏面积在光凝后7、14、21和28d经两两比较差异无统计学意义(P>0.05);光凝后7、14、21和28d早期和晚期荧光渗漏斑数经比较差异无统计学意义(P>0.05)。1.2 OCT检查激光处视网膜的平均厚度与平均荧光渗漏面积有相关性(r=0.73,P<0.05)。1.3并发症:2/10眼2/20光凝处少量视网膜下出血。2.奥曲肽和奥曲肽联合TTT对实验性CNV的抑制作用2.1 1组光凝后7和14d未见荧光渗漏,OCT见视网膜神经上皮层断裂,浅脱离;21和28d 20%(8/40)光凝处晚期形成局限性强荧光;OCT见局部RPE/脉络膜毛血管层增厚,呈白色高反射区域;1组所有观察时间荧光渗漏和视网膜的平均厚度与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2.2 2组在21和28d见较多的荧光素渗漏,但弱于空白对照组,弱渗漏点占41%(18/44)。2.3 3组在21d见少量的荧光素渗漏,弱渗漏点占35%(18/44),28d部分荧光素渗漏消失,OCT见28d CNV较21d变薄或消失;荧光渗漏和视网膜的平均厚度与2组相比有明显差异(P<0.05)。3.球后注射奥曲肽及奥曲肽联合TTT未见毒副作用和并发症。结论:1.532nm半导体激光易诱导BN大鼠CNV模型,成模率高且稳定性好。CNV在光凝后14d时完全形成。2.腹腔注射荧光素钠操作简便,显影清晰,可供采用。3.OCT联合FFA可客观有效地观察实验性CNV的形成和变化。4.球后注射奥曲肽可抑制大鼠实验性CNV的形成和发展,早期应用尤为必要。5.奥曲肽联合TTT可明显抑制实验性CNV的发展。6.实验BN大鼠球后注射奥曲肽及奥曲肽联合TTT治疗方法安全。
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