促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPK)级联反应系统是存在于真核生物中一种高度保守的信号转导途径。比较典型的MAPK级联反应系统是由三种蛋白激酶组成,即MAPKKK、MAPKK和MAPK,并且它们是通过MAPKKK-MAPKK-MAPK依次磷酸化作用将受体识别系统识别的胞外信号通过磷酸化其底物转录因子而传递到核内,导致转录组的重编程。因而其在植物防御病原菌的侵入中起着重要的作用。为了鉴定出作用于大豆GmMEKKI下游的GmMPK以及检测沉默GmMEKK1对不同GmMPK激活的效应,我们采用菜豆豆荚斑驳病毒诱导的基因沉默技术(BPMV-VIGS)沉默大豆GmMEKK1,通过Western Blotting用专一性识别MPK3/4/6磷酸化位点的抗体Phospho-p44/42 MAP Erk1/2进行蛋白激酶分析。我们发现,沉默大豆GmMEKK1,降低flg22对GmMPK6的激活,增强对GmMPK3的激活;在GmMPK4沉默株中也观察到与GmMEKK1沉默株中相似的效应,说明GmMEKKl与GmMPK4可能作用于同一线性途径。通过分析,我们还发现GmMPK3和GmMPK6在功能上有相互补偿的作用,沉默其中之一会增强flg22对另一个的激活程度。拟南芥中MPK4作用于MEKK1下游,在mekk1突变体中MPK4不能被激活。与在拟南芥中能够轻易检测到GmMPK4的激活不同,我们用不同浓度的flg22及水杨酸(SA)处理空载体植株以及上述各种沉默植株,采用不同检测激酶的方法,均检测不到GmMPK4的激活。由于检测不到GmMPK4的激活,因此无法确定大豆中MPK4是否像拟南芥MPK4一样作用于MEKK1下游。说明大豆与拟南芥在MPK4的激活上有着显著差异。