柑橘木虱田间种群药剂敏感性及选药试剂盒研制

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柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)属半翅目(Hemiptera)木虱科(Psyllia),其寄主为柑橘、九里香等芸香科植物,成虫、若虫均能给柑橘造成危害,引起嫩梢干枯、叶片畸形,其排泄物还会引起煤烟病,但其最重要的危害是传播柑橘黄龙病。至今为止,尚未发现可以对柑橘黄龙病进行根治的防治药剂,所以,通过控制柑橘木虱种群发生量是抑制柑橘黄龙病传播的重要手段之一。利用杀虫剂控制柑橘木虱种群数量是较为快速有效的方法,但由于长期不合理、不科学、无依据的大量使用化学药剂导致柑橘木虱对多数化学药剂产生了不同程度的抗药性。针对柑橘木虱化学防治中的精准、科学、高效防治策略,本文研究了柑橘木虱成、若虫对多种杀虫剂的敏感性,并研制出一种对田间柑橘木虱快速抗药性检测的选药试剂盒,以期筛选出高效的药剂指导田间应用,进而达到化学农药减施的目的。本文还通过测定不同柑橘木虱种群对酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、P450氧化酶活性,利用生化手段验证选药试剂盒区分剂量值的准确性,进一步了解柑橘木虱对杀虫剂产生抗药性的生化机制。主要研究结果如下:(1)对敏感柑橘木虱成虫触杀毒力表明:在新烟碱类药剂中,噻虫嗪对柑橘木虱成虫毒力最强,LC50值为0.29mg/L;毒力大小顺序为:噻虫嗪>吡虫啉>啶虫脒;在菊酯类药剂中,高效氯氟氰菊酯对柑橘木虱成虫毒力最强,LC50值为0.21mg/L;溴氰菊酯对柑橘木虱毒力相对较弱,LC50值为0.98mg/L,毒力大小顺序为:高效氯氟氰菊酯>联苯菊酯>溴氰菊酯;在有机磷药剂中,毒力大小顺序为:毒死蜱>喹硫磷。对柑橘木虱若虫触杀毒力表明:在新烟碱类药剂中,噻虫嗪对柑橘木虱若虫毒力最强,LC50值为0.24mg/L,毒力大小顺序为:噻虫嗪>吡虫啉>啶虫脒;在菊酯类药剂中,联苯菊酯对柑橘木虱若虫毒力最强,LC50值为0.35mg/L,溴氰菊酯对柑橘木虱毒力相对较弱,LC50值为0.64mg/L,毒力大小顺序为:联苯菊酯>高效氯氟氰菊酯>溴氰菊酯。在有机磷药剂中,毒死蜱>喹硫磷。(2)9种不同杀虫剂诊断剂量值分别为:吡虫啉:300mg/L;噻虫嗪:200mg/L;啶虫脒:700mg/L;吡丙醚:800 mg/L;联苯菊酯:40mg/L;高效氯氟氰菊酯:70mg/L;溴氰菊酯:150 mg/L;毒死蜱:1900mg/L;喹硫磷:2100 mg/L。在不同的温度保存条件下试剂盒可保存一个月对药剂药效无影响;在常温条件下使用试剂盒对药效无影响;利用生物测定法与诊断剂量法测定同一批次状态下的田间柑橘木虱成虫种群进行抗性评价标准,以生物测定法检测结果为标准,与其相比诊断剂量法检测结果准确率达到96.29%。(3)增城种群细胞色素P450氧化酶比活力最高为:0.28(μmol/min/mg protein),与敏感种群相比,其比活力是敏感种群的7.00倍,而从化、惠州、动物园与敏感种群相比,其比活力分别是敏感种群的3.50、3.00、1.50倍;从化种群谷胱甘肽-S-转移酶比活力最高为38.09(μmol/min/mg protein),与敏感种群相比,其比活力是敏感种群的4.42倍,而增城、惠州、动物园与敏感种群相比,其比活力分别是敏感种群的2.68、1.37、1.11倍;惠州种群酯酶比活力最高为9.08(μmol/min/mg protein),与敏感种群相比,其比活力是敏感种群的3.05倍,而增城、从化、动物园与敏感种群相比,其比活力分别是敏感种群的1.96、2.02、1.00倍。
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