目的：利用兔关节软骨细胞与软骨单位建立混合共培养体系，明确体外软骨细胞与软骨单位共培养构建软骨组织工程种子细胞的最佳比值。方法：将兔膝关节软骨分别用酶消化为软骨细胞与软骨单位后，按一定比例混合配制，分为五组，A组:单纯软骨细胞组；B组:比值为2:1的软骨细胞/软骨单位组；C组:比值为1:1的软骨细胞/软骨单位组；D组:比值为1:2的软骨细胞/软骨单位组；E:单纯软骨单位组。以2×105个细胞/孔接种于放有盖玻片的六孔板中，使细胞单层贴壁培养爬片，待细胞生长6日爬满后，进行指标检测： HE、番红O染色观察细胞组织形态学的变化，RT-PCR检测Agg、II型胶原和I型胶原的基因表达水平。Elisa检测上清液GAG、II型胶原的含量。结果：共培养组细胞形态正常。通过RT-PCR检测Agg、II型胶原和I型胶原的基因表达，Elisa检测上清液GAG、II型胶原的含量表明：采用共培养方法的软骨细胞与软骨单位的混合组中细胞代谢的表达要明显高于单纯软骨细胞组，尤其在软骨细胞/软骨单位共培养组（1:1），糖胺多糖与II型胶原在基因的表达和代谢情况均为最高。结论：在软骨组织工程移植种子细胞时，软骨细胞与软骨单位为1∶1的比例为最佳选择，适用于软骨组织工程。