论文部分内容阅读
原发性免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia, ITP)是一种器官特异性的自身免疫性疾病,表现为血小板数量减少和出血。多种免疫途径参与血小板的数量减少,包括自身抗体产生以及外周自身免疫性T细胞对血小板的破坏增多,以及自身抗体和CD8+T细胞对巨核细胞的攻击导致血小板生成减少。CD4+T细胞辅助B细胞产生血小板自身抗体,并分泌产生多种细胞因子,在ITP发病中发挥重要作用。T调节细胞(Treg)细胞数量和功能的异常对ITP发病也有关键性作用。近些年的研究发现具有免疫抑制功能的Treg细胞与Th17细胞具有密切的关系,尽管后者与Treg细胞的功能截然相反,在自身免疫性疾病中发挥重要的致病作用,但两者具有共同的前体细胞,根据所处环境中细胞因子的种类和水平,决定进一步分化的方向。我们长期随访观察了ITP外周血Treg细胞和Th17细胞的数量,发现Treg/Th17细胞比值与ITP病情相关,发病时比值降低,缓解时比值升高,发病时Treg的数量具有预后作用。进一步对Treg细胞的功能研究发现Treg细胞的工作模式有两种：在生理条件下Treg细胞主要依靠细胞间接触发挥免疫抑制作用；在炎症状态下通过分泌免疫调节因子,如IL-10等抑制过激的免疫反应。IL-10是一种重要的抑制性细胞因子,IFN-γ能诱导其分泌,能直接抑制Th1、Th17、以及IFN-γ+IL-17+Th细胞。近年来的研究发现分泌IL-10的Foxp3+Treg细胞对自身免疫疾病可能具有治疗作用。而ITP患者Treg细胞尽管胞内合成大量IL-10,但分泌IL-10相对不足,从而无法抑制过度激活的T效应细胞(T effector cells, Teff),是Treg细胞功能缺陷的原因之一。而过度激活的Teff细胞也可能参与ITP的发病,有待进一步的研究证实。巨核细胞是血小板产生的唯一来源,ITP疾病中巨核细胞生成血小板减少加重了ITP患者外周血血小板数量的减少。大量研究证实ITP患者的血浆、CD8+T细胞都可引起巨核细胞生成减少、成熟障碍、和血小板生成减少。然而CD4+T细胞是否对巨核细胞产生影响,目前没有报道。而一项小鼠ITP模型的研究发现,CD8+T细胞造成巨核细胞形态学改变、诱导血小板生成减少模型时,必须要有CD4+T细胞的参与,由此我们对CD4+T细胞如何帮助CD8+T细胞建立ITP模型发生兴趣,这种作用是通过CD8+T细胞间接实现的?还是CD4+T细胞本身对巨核细胞具有直接的抑制作用?我们分离出ITP患者骨髓干细胞,体外定向培养巨核细胞,从巨核细胞形态、巨核细胞生成、巨核细胞成熟、以及血小板产生、巨核细胞集落培养等方面进行分析,发现ITP患者的CD4+T细胞可能抑制巨核细胞的生成和成熟、减少血小板的形成。同时我们发现ITP患者骨髓干细胞本身可能有某些异常,导致定向培养的巨核细胞成熟障碍和生成血小板减少。但这些结论有待进一步增加实验样本明确。