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[目的]观察不同浓度二甲双胍对体外培养人成骨细胞增殖及Collagen Ⅰ、 LRP5mRNA表达的影响,进一步探讨二甲双胍对体外人成骨细胞作用的可能机制,为糖尿病骨质疏松的患者在降糖药物的选择上提供有价值的用药参考。[方法]1、以成人股骨颈部松质骨为材料,采用酶消化法体外培养人成骨细胞,观察其形态并对其进行功能鉴定。2、以人成骨细胞为体外实验模型,不同浓度的二甲双胍(0、25、50、100、200μ mol/L)刺激人成骨细胞72小时后,采用CCK-8比色法检测细胞增殖情况,测定OD值。3、不同浓度的二甲双胍(0、25、50、100、200μ mol/L)刺激体外培养人成骨细胞72小时后,用荧光定量RT-PCR法检测Collagen Ⅰ、LRP5mRNA表达。4、统计学方法采用SPSS16.0统计学软件对实验数据进行分析,实验所得数据均数±标准差表示,各组总体上有无差别采用单因素方差分析(one-way ANOVA),组间两两比较采用LSD-t法检验,P<0.05为差异有统计学意义。[结果]1、体外培养的人松质骨成骨细胞显微镜下观察呈梭形、纺锤形或不规则形,细胞表面有多个短突起,周围细胞以突起相连；骨钙素免疫组化法染色胞浆呈棕黄色；茜素红染色呈红色阳性钙化结节。2、不同浓度的二甲双胍(0、5、50、100、200μ mol/L)作用于人成骨细胞72小时后,各组OD值均增高,且呈浓度依赖性,在200μ mol/L时增殖最明显,对照组与实验组,实验组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3、采用荧光定量RT-PCR法检测Collagen Ⅰ, LRP5mRNA表达,结果显示：不同浓度的二甲双胍(0、25、50、100、200μ mol/L)可以促进Collagen Ⅰ> LRP5mRNA表达的能力,呈剂量依赖关系,在200μ mol/L表达最高,对照组与实验组,实验组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]1、二甲双胍可以促进人成骨细胞增殖。2、二甲双胍可以增加人成骨细胞Collagen Ⅰ、 LRP5mRNA表达。3、二甲双胍在一定浓度范围内可能通过Wnt/LRP5/β-catenin信号通路调节Collagen Ⅰ及LRP5mRNA表达促进人成骨细胞的增殖,从而促进骨形成。