牛磺酸和左旋肉毒碱协同抑制血管平滑肌细胞增殖和成骨分化

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目的:本实验旨在研究牛磺酸(taurine, TAU)和左旋肉毒碱(L-carnitine,LC)对调节血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖和成骨分化是否具有协同作用,并探讨其可能的作用机制。方法:应用3H-掺入法检测血管平滑肌细胞增殖。碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)活性用对硝基苯酚法检测,钙沉积量用原子吸收光谱测定法检测,研究牛磺酸和左旋肉毒对VSMCs成骨分化的影响。[3H]牛磺酸掺入法检测VSMCs牛磺酸摄取情况。采用Western blot检测牛磺酸转运体在VSMCs的表达。用小分子RNA干扰技术(shRNAs)抑制牛磺酸转运体的表达,以观察对左旋肉毒碱和牛磺酸抗有丝分裂和抗成骨分化作用的影响。结果:(1)牛磺酸对VSMCs增殖、β-甘油磷酸钠(p-GP)诱导的成骨分化具有抑制作用。(2)左旋肉毒碱仅抑制VSMCs增殖,对其成骨分化无影响。(3)牛磺酸和左旋肉毒对VSMCs增殖、P-GP诱导的成骨分化具有协同抑制作用。(4)左旋肉毒碱上调VSMCs牛磺酸摄取和转运体的表达。(5)shRNA转染沉默牛磺酸转运体可消除左旋肉毒碱和牛磺酸对VSMCs的协同作用。结论:左旋肉毒碱可促进VSMCs牛磺酸的摄取和牛磺酸转运体表达上调,协同牛磺酸抑制VSMCs的增殖和成骨分化。
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