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目的: 根据不同肝损伤机制，制备四氯化碳(CCl4)、刀豆蛋白A(ConA)、α-萘基异硫氰酸酯（ANIT）、急性酒精性肝损伤等动物肝损伤模型，考察模型造模条件、检测方法，优化检测指标，并对各种模型的阳性药物进行筛选，明确适宜的染毒剂量、染毒时间、染毒途径、合适的阳性药物及疗效判定指标等，初步建立标准化的保肝药物筛选平台。利用相关平台，通过规范化的实验研究方法，评价痰热清注射液、芍药甘草汤等药物的保肝护肝作用，为进一步研究和开发保肝药物提供实验依据和技术支撑。 方法: 1.保肝药物活性筛选方法的技术优化 1.1 四氯化碳致小鼠急性化学性肝损伤模型的优化:ICR小鼠腹腔注射CCl4植物油溶液染毒，通过考察小鼠血清指标ALT、AST和TBA值的变化和病理切片、HE染色结果，研究不同性别、染毒剂量(16mg/kg、24mg/kg、32mg/kg)、染毒时间(13h、15h、17h、20h)和多种阳性药物（熊去氧胆酸、硫普罗宁及联苯双酯）对CCl4致小鼠肝损伤的影响。 1.2 α-萘基异硫氰酸酯致大鼠急性化学性肝损伤模型的优化:Wistar大鼠灌胃给予ANIT植物油溶液染毒，通过考察大鼠血清指标ALT、AST、TBIL、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，研究不同染毒剂量(60mg/kg、80mg/kg)、染毒时间(24h、38h、48h、62h、72h和90h)和多种阳性药物（熊去氧胆酸、硫普罗宁及联苯双酯）对ANIT致大鼠肝损伤的影响。 1.3 乙醇致小鼠急性肝损伤模型的优化:ICR小鼠灌胃给予乙醇染毒，通过考察小鼠血清指标ALT、AST、TG、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，研究不同染毒剂量(3156mg/kg、4734mg/kg和6312mg/kg)、染毒时间(13h、16h、19h、24h)和多种阳性药物（熊去氧胆酸、硫普罗宁及联苯双酯）对乙醇致小鼠肝损伤的影响。 1.4 刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤模型的优化:小鼠尾静脉注射给予ConA生理盐水溶液染毒，通过考察小鼠血清指标ALT、AST、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，研究不同品系（ICR小鼠、BALB/c小鼠、KM小鼠）、不同性别、染毒剂量(6mg/kg、8mg/kg、11mg/kg)、染毒时间(5h、6h、7h、8h、21h、48h、72h)和多种阳性药物（熊去氧胆酸、硫普罗宁及联苯双酯）对ConA致小鼠肝损伤的影响。 2.保肝药物的筛选与评价 2.1 痰热清注射液保肝作用的研究 2.1.1 痰热清注射液对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用:小鼠尾静脉注射给予痰热清注射液高（12mL/kg）、中(8mL/kg)、低(4mL/kg)三个剂量，给药14天后腹腔注射16mg/kg CCl4植物油溶液染毒，染毒13h后，通过考察小鼠血清指标ALT、AST、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，评价痰热清注射液对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用。 2.1.2 痰热清注射液对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用:大鼠尾静脉注射给予痰热清注射液高(12mL/kg)、中(8mL/kg)、低(4mL/kg)三个剂量，给药14天后灌胃给予60mg/kg ANIT植物油溶液染毒，染毒24h后，通过考察大鼠血清指标ALT、AST、TBIL、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，评价痰热清注射液对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用。 2.1.3 痰热清注射液对乙醇致小鼠肝损伤模型的保护作用:小鼠尾静脉注射给予痰热清注射液高(12mL/kg)、中(8mL/kg)、低(4mL/kg)三个剂量，给药14天后灌胃给予4734mg/kg乙醇纯水溶液染毒，染毒16h后，通过考察小鼠血清指标ALT、AST、TG、TBA值的变化以及病理切片、HE染色结果，评价痰热清注射液对乙醇致小鼠肝损伤模型的保护作用。 2.1.4 痰热清注射液对ConA致小鼠肝损伤模型的保护作用:小鼠尾静脉注射给予痰热清注射液高（12mL/kg）、中(8mL/kg)、低(4mL/kg)三个剂量，给药14天后尾静脉注射给予11mg/kg ConA生理盐水溶液染毒，染毒7h后，通过考察小鼠血清指标ALT、AST和TBA值的变化和病理切片、HE染色结果，评价痰热清注射液对ConA致小鼠肝损伤模型的保护作用。 2.2 芍药甘草汤保肝作用的研究 2.2.1 芍药甘草汤对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用:小鼠灌胃给予芍药甘草汤高(20g/kg)、中(10g/kg)、低(5g/kg)三个剂量，给药14天后腹腔注射16mg/kgCCl4植物油溶液染毒，染毒13h后，通过考察小鼠血清指标ALT、AST和TBA值的变化和病理切片、HE染色结果，评价芍药甘草汤对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用。 2.2.2 芍药甘草汤对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用:大鼠灌胃给予芍药甘草汤高(20g/kg)、中(10g/kg)、低(5g/kg)三个剂量，给药14天后灌胃给予60mg/kgANIT植物油溶液染毒，染毒24h后，通过考察大鼠血清指标ALT、AST、TBIL和TBA值的变化和病理切片、HE染色结果，评价芍药甘草汤对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用。 结果: 1.保肝药物活性筛选方法的技术优化 1.1 四氯化碳致小鼠急性化学性肝损伤模型:雄性小鼠较雌性小鼠敏感，损伤程度稳定且均一;16mg/kg、24mg/kg染毒13h，32mg/kg染毒17h，血清ALT、AST值显著升高，达到峰值;联苯双酯对于此模型ALT活性的降低作用最为显著。 1.2 α-萘基异硫氰酸酯致大鼠急性化学性肝损伤模型:60mg/kg、80mg/kg染毒48h，血清ALT、AST活性显著升高，达到峰值;联苯双酯对于此模型ALT活性的降低作用最为显著。 1.3 乙醇致小鼠急性肝损伤模型:3156mg/kg、4734mg/kg染毒16h，6312mg/kg染毒19h，血清TG活性显著升高，达到峰值;硫普罗宁对于此模型TG活性的降低作用最为显著。 1.4 刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤模型:BALB/c雄性小鼠对此模型较敏感且耐受性好;6mg/kg、8mg/kg染毒22h，11mg/kg染毒8h，血清ALT、AST活性显著升高，达到峰值;联苯双酯对于此模型ALT活性的降低作用最为显著。 2.保肝药物的筛选与评价 2.1 痰热清注射液保肝作用的研究 2.1.1 痰热清注射液对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用:痰热清注射液高、中、低三个剂量均可抑制CCl4致小鼠血清ALT、AST活性的升高，且具有统计学差异(P＜0.05)，提示痰热清注射液对CCl4所致肝损伤具有一定的保护作用。 2.1.2 痰热清注射液对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用:痰热清注射液高、中、低三个剂量对ANIT致大鼠肝损伤模型中血清生化酶指标升高无明显抑制作用。 2.1.3 痰热清注射液对乙醇致小鼠肝损伤模型的保护作用:痰热清注射液高、中剂量均可抑制乙醇致小鼠肝损伤模型血清TG值的升高，且具有统计学差异(P＜0.05)，提示痰热清注射液对乙醇所致肝损伤具有一定的保护作用。 2.2 芍药甘草汤保肝作用的研究 2.2.1 芍药甘草汤对CCl4致小鼠肝损伤模型的保护作用:芍药甘草汤高、中、低三个剂量对CCl4致小鼠肝损伤模型中血清生化酶指标升高无明显抑制作用。 2.2.2 芍药甘草汤对ANIT致大鼠肝损伤模型的保护作用:芍药甘草汤高剂量组可显著抑制ANIT致大鼠肝损伤模型血清ALT活性的升高，与模型组相比具有统计学意义(P＜0.05)，中、低剂量有抑制大鼠血清ALT活性升高的趋势，提示芍药甘草汤对ANIT所致肝损伤具有一定的保护作用。 结论: 1.根据不同肝损伤机制，考察并建立了四氯化碳(CCl4)、刀豆蛋白A(ConA)、α-萘基异硫氰酸酯(ANIT)、急性酒精性肝损伤等动物肝损伤模型，优化了适宜技术方案及评价指标，初步建立了标准化的基于急性肝损伤模型的保肝药物筛选技术平台。 1.1 四氯化碳致小鼠急性化学性肝损伤模型中，雄性小鼠、染毒剂量16mg/kg、染毒13h可以作为观察药效作用的适宜技术参数，该模型之阳性药物可以选择联苯双酯; 1.2 α-萘基异硫氰酸酯致大鼠急性化学性肝损伤模型中，染毒剂量60mg/kg、染毒24h可以作为观察药效作用的适宜技术参数，该模型之阳性药物可以选择联苯双酯; 1.3 乙醇致小鼠急性肝损伤模型中，染毒剂量4734mg/kg、染毒16h可以作为观察药效作用的适宜技术参数，该模型之阳性药物可以选择硫普罗宁; 2.采用标准化的基于急性肝损伤模型的保肝药物筛选技术平台，评价了痰热清注射液、芍药甘草汤等药物的保肝护肝作用，为进一步研究和开发保肝药物提供实验依据和技术支撑。 2.1 痰热清注射液对CCl4、乙醇和ConA所致动物急性肝损伤具有一定的保护作用; 2.2 芍药甘草汤对ANIT、乙醇和ConA所致动物急性肝损伤具有一定的保护作用。