淫羊藿苷在磨损颗粒诱导破骨细胞活化中的作用

被引量 : 0次 | 上传用户:woshi52038
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察淫羊藿苷(Icariin, ICA)对钛颗粒(titanium particles, Ti)诱导破骨细胞活化的影响并探讨其可能的作用机理。方法:钛颗粒(titanium particles, Ti)和或核因子кB受体配体(Receptor activator ofnuclear factor кB ligand, RANKL)诱导小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,加入不同浓度的淫羊藿苷(Icariin, ICA)进行干预。实验分为5组:单纯RAW264.7细胞,不加任何处理因素即空白对照组;Ti颗粒诱导RAW264.7细胞即Ti组;50ng/mL RANKL和50ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor, M-CSF)诱导RAW264.7细胞即RANKL组;50ng/mL RANKL+M-CSF和Ti颗粒共同诱导RAW264.7细胞即RANKL+Ti组;50ng/mL RANKL+M-CSF和Ti颗粒共同诱导RAW264.7细胞后加入ICA进行干预,即ICA组。观察RAW264.7细胞形态学变化;CCK-8法检测不同浓度的Ti颗粒或(和) ICA对RAW264.7细胞增值活性的影响;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定成熟破骨细胞;扫描电镜观察骨吸收陷窝检测骨吸收功能;定量RT-PCR检测肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、白介素1β(Interleukin1beta, IL-1β)、组织蛋白酶K (cathepsin K, CatK)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase9, MMP-9)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acidphosphatase,TRAcP)、核因子кB受体活化因子(Receptor activator of nuclear factor кB,RANK)等破骨细胞活化相关基因mRNA的表达情况。结果:1.光镜下见RAW264.7细胞为直径较小的圆形单核细胞,易贴壁,增殖较快,加入Ti颗粒后,可见RAW264.7细胞吞噬Ti颗粒现象,胞体变大。CCK-8结果表明Ti颗粒在0.001、0.01、0.1mg/ml时对RAW264.7细胞的增值活性无明显影响(P>0.05),而1mg/ml对RAW264.7细胞的增殖活性有明显影响(P<0.05);ICA在1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L时不影响RAW264.7细胞增殖(P>0.05),而1×10-4mol/L ICA明显抑制RAW264.7细胞增殖活性(P<0.05);将0.1mg/ml Ti颗粒与ICA (1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L)共培养RAW264.7细胞后,与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.TRAP染色阳性破骨细胞为胞浆红色的多核细胞。诱导5天后经TRAP染色,Ti组、RANKL组、RANKL+Ti组观察到的多核破骨细胞数量(个/cm2)分别为Ti组21.0±1.43,RANKL组181.17±5.67,RANKL+Ti组232.00±5.22,与空白对照组(4.33±1.03)比较差异有统计学意义(P<0.05);RANKL+Ti组、RANKL组与Ti组之间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);加入不同浓度ICA干预后,破骨细胞数量分别为156.74±8.04(1×10-7mol/L)、104.6±6.07(1×10-6mol/L)和50.00±7.48(1×10-5mol/L),与RANKL+Ti组比较有统计学意义(P<0.05)。3.扫描电镜观察Ti组、RANKL组和RANKL+Ti组骨吸收陷窝数量(个/well)及面积(%/well)分别为(27.4±3.42,7.3±0.37%)、(140.9±6.19,27.0±1.51%)、(177.3±7.41,34.1±1.95%),与空白组(3.5±1.29,0.8±0.07)比较差异有统计学意义(P<0.05),RANKL+Ti组、RANKL组与Ti组之间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);而ICA组的骨吸收陷窝数量和吸收面积随浓度1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L增高而减少,依次为(135.8±4.86,25.9±2.10)、(90.7±3.50,19.8±0.74)、(71.8±6.60,15.9±1.26),与RANKL+Ti组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4.定量RT-PCR结果显示,TNF-α、IL-1β、MMP-9、Catk、RANK、TRAcP基因mRNA表达水平分别为:Ti组(1.75±0.10,2.15±0.18,1.90±0.11,1.91±0.14,2.24±0.29,1.99±0.14), RANKL组(1.70±0.12,2.35±0.28,30.45±5.68,15.94±1.04,2.62±0.17,29.68±4.43),RANKL+Ti组(4.07±0.39,40.00±4.31,149.87±8.40,40.14±3.28,56.89±5.65,52.50±6.35),与空白组(1.00±0.11,1.00±0.10,1.00±0.13,1.00±0.12,1.00±0.10,1.00±0.11)比较,差异有统计学意义(P<0.05);加入ICA (1×10-6mol/L)后上述基因表达水平分别为(1.90±0.15,23.01±4.18,16.40±1.15,10.42±1.67,37.02±4.30,28.04±5.11),与RANKL+Ti组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ti颗粒能上调TNF-α、IL-1β、MMP-9、Catk、RANK、TRAcP基因mRNA的表达,诱导破骨细胞的活化并增强破骨细胞性骨吸收;而ICA能下调上述各基因mRNA的表达,抑制Ti颗粒诱导的破骨细胞活化和骨吸收功能。ICA可能会成为一种治疗假体无菌性松动的新选择。
其他文献
铬主要应用于三个领域:冶金、耐火材料和化学工业,用途广泛,是一种具有重要意义的金属。中国铬铁矿资源贫乏,保有储量仅占世界储量的0.15%,而且分布零散,矿床规模小,近一半是
目的以A医院购置64排螺旋CT为例,预测分析大型医疗设备的单机使用效益,为医院的设备购置提供借鉴。方法建立设备效益评价指标体系,用净现值法预测分析CT设备的效益现值和费用
<正>海洋塑料污染十分严重海洋塑料污染并不是一个新的话题。早在2010年美国国家生态分析与综合中心以及乔治亚大学的科学家们当时估计,每年全球有约800万吨塑料垃圾流入海洋
目的:就我国大型医疗设备配置所产生的问题,分析建立科学规范的管理系统,探索引进医疗设备成本效益分析对大型医疗设备配置管理的积极意义。方法:以经济收益和使用效率两种参
目的:构建医疗设备应用安全和质量控制,确保医疗诊治质量、保证患者安全、避免医疗纠纷。方法:通过加强采购管理,注重使用、维修、质量检测、计量等一系列措施,建立起医疗设
目的:探讨非药物治疗措施缓解新生儿疼痛的效果。方法:将80例住院新生儿随机分为非营养性吸吮组(对照组)和非营养性吸吮联合拥抱抚触组(观察组)各40例,在采足跟血疼痛刺激前,刺激后
<正>新疆维吾尔自治区人民医院是一家大型三级甲等综合医院,坚持"以病人为中心",近年采取多项措施对主要住院指标进行管理,取得了一定成效,为逐步缓解各族患者疾病经济负担打
目的观察解郁丸联合帕罗西汀片治疗卒中后抑郁的临床疗效、中医证候疗效。方法将73例卒中后抑郁患者随机分为治疗组40例,对照组33例。对照组口服盐酸帕罗西汀片20 mg·d-1,最
我是一名由跨科考学进入鲁迅美术学院学习综合绘画的学生,大学在西北师范大学就读经济学专业,三年研究生学习,在导师的引导和鼓励下我认识到,跨界学习的经历是我自身最大原创性的体现。学习过程中,对绘画从视角、思路、认知、表达等方面我都结合经济学的知识有了相应的理解。经济与绘画并非两条无关联的平行线,经济学的学习与绘画的学习相接触后,我亲身体验到两者是协同发展相互促进的共生作用,本篇论文主要从跨界学习过程中