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研究背景与目的：
食管癌 (Esophageal cancer, EC) 是一种高发病率和病死率的疾病，位居全球癌症死因的第六位，预后较差，严重危害人类的健康。食管癌系指食管鳞状上皮或腺上皮的异常增生所形成的恶性肿瘤，包括食管腺癌和食管鳞状细胞癌两种临床亚型。中国是食管鳞状细胞癌的高发地区，每年新发病例数约占全球总发病数的50%以上。食管鳞癌早期临床症状不明显，较难发现，且目前缺乏有效的癌前病变筛查诊断标志物，五年内的整体生存率仅有15%。因此，探索潜在的表观遗传标志物，不但可以促进食管鳞癌的早期识别和干预，降低癌变率；而且有助于临床靶向治疗的发展，改善患者整体预后情况。
环状RNA (circular RNAs, circRNAs) 是一类新型的非编码RNA分子，具有共价闭合结构，不易被核酸外切酶所降解，表现为高度稳定性，保守性和特异性。近年来，大量证据表明环状RNA能够在基因调控过程中发挥关键作用，参与介导多种疾病的发生发展。此外，随着研究的不断深入，报道发现环状RNA 可能与肿瘤异常增殖，分化和转移等生物学过程密切相关，扮演着类癌基因或抑癌基因的角色。因此，环状RNA作为一种新型生物标志物，可能在食管鳞癌的恶性表型变化，分子机制和诊疗方面中发挥重要的作用。
课题组前期采用二代高通量测序技术，筛选出在食管鳞癌患者癌组织中表达上调的环状 RNA, hsa_circ_0001707。为此，本研究的主要目的是探讨hsa_circ_0001707在食管鳞癌中发挥的生物学功能及其参与调控的分子机制。验证hsa_circ_0001707在人群组织样本中的差异表达情况，探讨其表达水平与食管鳞癌发病风险之间的相关性，有望为食管鳞癌早期筛查诊断，患者预后评估和临床治疗新靶点的发现提供理论依据。
研究方法：
一、qRT-PCR检测hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织样本中的表达，分析其表达水平在癌组织及癌旁组织中的差异；条件logistic回归分析探讨hsa_circ_0001707的表达水平与食管鳞癌发病风险之间的相关性；通过绘制 ROC 曲线，评估hsa_circ_0001707作为生物标志物的诊断价值。分别应用Rnase R, 放线菌素D抑制试验，普通琼脂糖凝胶电泳试验检测hsa_circ_0001707的一般环状特性及稳定性，并比较其与亲本基因之间的区别；
二、检测hsa_circ_0001707对食管鳞癌细胞发挥的生物学功能: 构建慢病毒载体，分别转染至食管鳞癌细胞株EC109及EC9706中，获得hsa_circ_0001707稳定过表达和干扰细胞株，qRT-PCR检测转染效率; 应用CCK-8, EdU, 平板克隆试验，transwell体外迁移和侵袭试验检测hsa_circ_0001707对细胞活性，增殖能力，克隆形成能力以及侵袭迁移能力的影响。
三、分析hsa_circ_0001707的亚细胞定位: 应用荧光原位杂交技术 (FISH) 和细胞核质分离试验检测hsa_circ_0001707在食管鳞癌细胞中的定位；通过生物信息学分析预测hsa_circ_0001707可能结合的靶miRNAs, 并应用双荧光素酶报告基因试验 (DLR) 进一步筛选，确定候选靶miRNA;
四、检测hsa_circ_0001707与靶miRNA的相互调控关系: 干扰hsa_circ_0001707的表达水平后，qRT-PCR 检测 miR-203a-3p 的表达情况，DLR 试验确定两者之间的相互调控关系。设计挽救试验，在hsa_circ_0001707稳定干扰细胞株中转染miR-203a-3p inhibitor, 通过CCK-8, 平板克隆试验，transwell侵袭迁移试验进一步验证两者之间的调控关系。
五、应用DLR试验，qRT-PCR结合western Blot技术确定hsa_circ_0001707以“分子海绵”的形式间接调控靶 miR-203a-3p 下游的靶基因及其信号转导通路。
研究结果：
一、Hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织中的表达及其一般特性验证
1. 本研究收集了 96 对食管鳞状细胞癌患者的癌组织及其配对癌旁组织，应用qRT-PCR检测hsa_circ_0001707在组织中的表达水平。结果显示，与正常癌旁组织相比， hsa_circ_0001707 在癌组织中表达量显著升高，差异有统计学意义(p<0.001)。
2. 条件logistic分析结果显示，在癌组织中表达上调的hsa_circ_0001707可增加食管鳞癌的发病风险，OR 值为 2.323，是食管鳞癌发生的危险因素。通过绘制ROC 曲线，结果发现，hsa_circ_0001707 具有较高的诊断价值，AUC 为 0.793 (95%CI: 0.730~0.855) ，灵敏度为 0.735 ，特异度为 0.724 ，差异有统计学意义( p<0.001)。
3. Rnase R试验及放线菌素D抑制试验结果显示，与亲本基因ABCA13相比， hsa_circ_0001707具有更高的稳定性；
4. 普通琼脂糖凝胶电泳结合sanger测序的结果表明，hsa_circ_0001707并非基因错误剪辑的产物，而是由其母基因的内含子反向剪接形成，属于内含子型circRNA。
二、Hsa_circ_0001707对食管鳞癌细胞生物学功能的影响
1. 在食管鳞癌细胞系EC109, EC9706, KYSE510以及正常食管上皮细胞Het-1A中，应用qRT-PCR检测hsa_circ_0001707的表达。数据表明，与Het-1A细胞相比，hsa_circ_0001707在鳞癌细胞中表达显著上调 (p<0.05);
2. 构建含有 hsa_circ_0001707 全长序列的慢病毒表达载体，分别转染至食管鳞癌细胞株EC109及EC9706中，qRT-PCR检测转染效率。结果显示，与空载体对照组 (lv-NC) 相比，EC109 及 EC9706 细胞中, hsa_circ_0001707 过表达组 (lv-circ-0001707) 的表达水平分别提高10倍和40倍，干扰组 (sh-circ-0001707) 相比于阴性对照 (sh-NC) 分别被敲低65%和75%(p<0.05)。
3. Hsa_circ_0001707过表达可以增强细胞活性和增殖能力，促进细胞侵袭和迁移，提高细胞克隆形成能力。CCK-8结果表明，两种细胞中lv-circ-0001707组的吸光度 (OD) 值在24h，48h，72h和96h时间点时均高于lv-NC组 (p<0.05, n=6)；EdU 结果表明，hsa_circ_0001707 表达上调可明显增强食管鳞癌细胞增殖能力(p<0.05)；Transwell试验证实，高表达的hsa_circ_0001707可明显提高肿瘤细胞的迁移和侵袭能力(p<0.05)；平板克隆试验结果显示，与对照组相比， hsa_circ_0001707高表达组细胞的克隆形成数量明显增加 (p<0.05)。
4. 当 hsa_circ_0001707 的表达水平受到干扰时，食管鳞癌细胞的活性，增殖能力，克隆形成能力和侵袭迁移能力均显著减弱 (p<0.05)。
三、Hsa_circ_0001707调控食管鳞癌的“分子海绵”机制分析
1. 荧光原位杂交技术 (FISH) 结合核质分离试验结果表明，hsa_circ_0001707在胞质和胞核中均有分布，但主要存在于细胞质中，提示其发挥功能的主要场所在细胞质；
2. Hsa_circ_0001707可以ceRNA方式“竞争性吸附”miR-203a-3p: qRT-PCR结果显示，干扰 hsa_circ_0001707 的表达可明显上调 miR-203a-3p 的表达水平(p<0.05)。构建hsa_circ_0001707的野生型 (WT) 和突变型 (MUT) 报告基因载体，DLR试验验证两者的相互结合关系。结果表明，hsa_circ_0001707 (WT)+miR-203a-3p 组的荧光值显著减弱，与hsa_circ_0001707 (WT) +miR-NC组相比，相对降低约37%；与含有hsa_circ_0001707突变型质粒组相比，荧光素酶活性降低约41%(p<0.001)。
3. 细胞挽救实验结果表明，在 hsa_circ_0001707 稳定干扰的两种食管鳞癌细胞株中转染miR-203a-3p inhibitor后, 可以部分逆转hsa_circ_0001707干扰表达对细胞活性，克隆形成能力及侵袭迁移能力的抑制作用。
4. Hsa_circ_0001707/miR-203a-3p/Snail2 参与调控食管鳞癌细胞的上皮-间充质转化过程: 首先，应用公共数据库预测，同时分析 TCGA 数据库中差异表达mRNA，各组结果取交集，筛选出miR-203a-3p的下游靶基因Snail2。在EC109及EC9706细胞中分别转染miR-203a-3p mimic/NC, western blot及qRT-PCR结果显示，过表达miR-203a-3p可显著抑制Snail2蛋白及mRNA的表达水平 (p<0.05)。进一步地，构建Snail2基因的WT及MUT报告基因载体，双荧光素酶报告基因试验结果显示，miR-203a-3p+Snail2 (WT) 实验组的荧光信号值显著降低，与miR-NC+Snail2 (WT) 组相比，下降约40%；与含有Snail2 突变型质粒组相比，下降约48%(p<0.001)。该结果表明miR-203a-3p可与Snail2 3’UTR 区域特异性结合。
在此基础上，为了进一步验证hsa_circ_0001707可与Snail2竞争性结合miR-203a-3p, 我们分别在两株食管鳞癌细胞中另设两组进行实验：(1) lv-circ-0001707+Snail2 (WT)+miR-203a-3p;(2) lv-NC+Snail2 (WT)+miR-203a-3p。结果显示，与第一组相比， EC109 中第二组的荧光信号值显著减弱，相对降低约 31%。EC9706中第二组的荧光强度相对减弱了27%，差异有统计学意义 (p<0.001)。同时，western blot结果显示，hsa_circ_0001707敲低表达可导致Snail2基因的表达下降，蛋白水平在EC109和EC9706细胞中分别降低了40%, 48%, 差异具有统计学意义 (p<0.05)。
在两株食管鳞癌细胞中分别转染 miR-203a-3p mimic/NC, western blot 检测EMT关键信号因子的表达。结果显示，与miR-NC组相比，EC109细胞中miR-203a-3p mimic 组的 E-cadherin 蛋白表达水平恢复了 30%, 而 N-cadherin 和Vimentin的蛋白表达水平下降，相对降低了40%, 32%(p<0.05)。在EC9706细胞中，miR-203a-3p mimic 组的E-cadherin蛋白表达明显上调，增加了31%。同时， N-cadherin和Vimentin的蛋白水平受到抑制，分别降低了35%, 44%(p<0.05)。
在两种 hsa_circ_0001707 稳定干扰的食管鳞癌细胞株中，进一步检测 EMT通路关键信号因子的表达。结果表明，在EC109细胞中敲低hsa_circ_0001707的表达后，可导致N-cadherin和vimentin的表达下降，与空载体组相比，分别下降55%, 63%。而上皮型钙粘附蛋白 E-cadherin 的蛋白水平显著升高，相对恢复了30% (p<0.05)。转染了 miR-203a-3p inhibitor 后,可以部分逆转这一结果。与 sh-circ-0001707组相比，E-cadherin的表达水平下调20%，N-cadherin和vimentin的表达水平分别上调 27%, 29% (p<0.05)。在另一株细胞 EC9706 中对hsa_circ_0001707敲低处理后，与对照组相比，E-cadherin的蛋白水平恢复了35%， N-cadherin 和 vimentin 的蛋白表达降低，分别下降 57%, 60% (p<0.05)。提示hsa_circ_0001707 表达下调后可以抑制食管鳞癌细胞的 EMT 发生。此结果在转染 miR-203a-3p inhibitor 后得到逆转，相较于 sh-circ-0001707 组，miR-203a-3p inhibitor组的E-cadherin蛋白表达水平降低了17%，而N-cadherin和vimentin的蛋白表达水平有所恢复，分别升高了20%, 17%(p<0.05)。
结论：
1. Hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织中表达上调，高表达的hsa_circ_0001707可以增加食管鳞癌的发病风险，对于食管鳞癌具有较好的诊断准确性，是潜在的生物标志物。
2. Hsa_circ_0001707过表达可以提高细胞活性，增强细胞增殖能力，克隆形成能力，促进细胞侵袭迁移。干扰其表达后可以抑制食管癌细胞的恶性表型，表明hsa_circ_0001707在食管癌细胞中发挥着癌基因样的作用。
3. Hsa_circ_0001707可以作为miR-203a-3p的“分子海绵”，间接调控其下游靶基因Snail2的表达。Hsa_circ_0001707/miR-203a-3p/Snail2信号通路轴参与调控食管鳞癌细胞的上皮-间充质转化过程。
食管癌 (Esophageal cancer, EC) 是一种高发病率和病死率的疾病，位居全球癌症死因的第六位，预后较差，严重危害人类的健康。食管癌系指食管鳞状上皮或腺上皮的异常增生所形成的恶性肿瘤，包括食管腺癌和食管鳞状细胞癌两种临床亚型。中国是食管鳞状细胞癌的高发地区，每年新发病例数约占全球总发病数的50%以上。食管鳞癌早期临床症状不明显，较难发现，且目前缺乏有效的癌前病变筛查诊断标志物，五年内的整体生存率仅有15%。因此，探索潜在的表观遗传标志物，不但可以促进食管鳞癌的早期识别和干预，降低癌变率；而且有助于临床靶向治疗的发展，改善患者整体预后情况。
环状RNA (circular RNAs, circRNAs) 是一类新型的非编码RNA分子，具有共价闭合结构，不易被核酸外切酶所降解，表现为高度稳定性，保守性和特异性。近年来，大量证据表明环状RNA能够在基因调控过程中发挥关键作用，参与介导多种疾病的发生发展。此外，随着研究的不断深入，报道发现环状RNA 可能与肿瘤异常增殖，分化和转移等生物学过程密切相关，扮演着类癌基因或抑癌基因的角色。因此，环状RNA作为一种新型生物标志物，可能在食管鳞癌的恶性表型变化，分子机制和诊疗方面中发挥重要的作用。
课题组前期采用二代高通量测序技术，筛选出在食管鳞癌患者癌组织中表达上调的环状 RNA, hsa_circ_0001707。为此，本研究的主要目的是探讨hsa_circ_0001707在食管鳞癌中发挥的生物学功能及其参与调控的分子机制。验证hsa_circ_0001707在人群组织样本中的差异表达情况，探讨其表达水平与食管鳞癌发病风险之间的相关性，有望为食管鳞癌早期筛查诊断，患者预后评估和临床治疗新靶点的发现提供理论依据。
研究方法：
一、qRT-PCR检测hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织样本中的表达，分析其表达水平在癌组织及癌旁组织中的差异；条件logistic回归分析探讨hsa_circ_0001707的表达水平与食管鳞癌发病风险之间的相关性；通过绘制 ROC 曲线，评估hsa_circ_0001707作为生物标志物的诊断价值。分别应用Rnase R, 放线菌素D抑制试验，普通琼脂糖凝胶电泳试验检测hsa_circ_0001707的一般环状特性及稳定性，并比较其与亲本基因之间的区别；
二、检测hsa_circ_0001707对食管鳞癌细胞发挥的生物学功能: 构建慢病毒载体，分别转染至食管鳞癌细胞株EC109及EC9706中，获得hsa_circ_0001707稳定过表达和干扰细胞株，qRT-PCR检测转染效率; 应用CCK-8, EdU, 平板克隆试验，transwell体外迁移和侵袭试验检测hsa_circ_0001707对细胞活性，增殖能力，克隆形成能力以及侵袭迁移能力的影响。
三、分析hsa_circ_0001707的亚细胞定位: 应用荧光原位杂交技术 (FISH) 和细胞核质分离试验检测hsa_circ_0001707在食管鳞癌细胞中的定位；通过生物信息学分析预测hsa_circ_0001707可能结合的靶miRNAs, 并应用双荧光素酶报告基因试验 (DLR) 进一步筛选，确定候选靶miRNA;
四、检测hsa_circ_0001707与靶miRNA的相互调控关系: 干扰hsa_circ_0001707的表达水平后，qRT-PCR 检测 miR-203a-3p 的表达情况，DLR 试验确定两者之间的相互调控关系。设计挽救试验，在hsa_circ_0001707稳定干扰细胞株中转染miR-203a-3p inhibitor, 通过CCK-8, 平板克隆试验，transwell侵袭迁移试验进一步验证两者之间的调控关系。
五、应用DLR试验，qRT-PCR结合western Blot技术确定hsa_circ_0001707以“分子海绵”的形式间接调控靶 miR-203a-3p 下游的靶基因及其信号转导通路。
研究结果：
一、Hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织中的表达及其一般特性验证
1. 本研究收集了 96 对食管鳞状细胞癌患者的癌组织及其配对癌旁组织，应用qRT-PCR检测hsa_circ_0001707在组织中的表达水平。结果显示，与正常癌旁组织相比， hsa_circ_0001707 在癌组织中表达量显著升高，差异有统计学意义(p<0.001)。
2. 条件logistic分析结果显示，在癌组织中表达上调的hsa_circ_0001707可增加食管鳞癌的发病风险，OR 值为 2.323，是食管鳞癌发生的危险因素。通过绘制ROC 曲线，结果发现，hsa_circ_0001707 具有较高的诊断价值，AUC 为 0.793 (95%CI: 0.730~0.855) ，灵敏度为 0.735 ，特异度为 0.724 ，差异有统计学意义( p<0.001)。
3. Rnase R试验及放线菌素D抑制试验结果显示，与亲本基因ABCA13相比， hsa_circ_0001707具有更高的稳定性；
4. 普通琼脂糖凝胶电泳结合sanger测序的结果表明，hsa_circ_0001707并非基因错误剪辑的产物，而是由其母基因的内含子反向剪接形成，属于内含子型circRNA。
二、Hsa_circ_0001707对食管鳞癌细胞生物学功能的影响
1. 在食管鳞癌细胞系EC109, EC9706, KYSE510以及正常食管上皮细胞Het-1A中，应用qRT-PCR检测hsa_circ_0001707的表达。数据表明，与Het-1A细胞相比，hsa_circ_0001707在鳞癌细胞中表达显著上调 (p<0.05);
2. 构建含有 hsa_circ_0001707 全长序列的慢病毒表达载体，分别转染至食管鳞癌细胞株EC109及EC9706中，qRT-PCR检测转染效率。结果显示，与空载体对照组 (lv-NC) 相比，EC109 及 EC9706 细胞中, hsa_circ_0001707 过表达组 (lv-circ-0001707) 的表达水平分别提高10倍和40倍，干扰组 (sh-circ-0001707) 相比于阴性对照 (sh-NC) 分别被敲低65%和75%(p<0.05)。
3. Hsa_circ_0001707过表达可以增强细胞活性和增殖能力，促进细胞侵袭和迁移，提高细胞克隆形成能力。CCK-8结果表明，两种细胞中lv-circ-0001707组的吸光度 (OD) 值在24h，48h，72h和96h时间点时均高于lv-NC组 (p<0.05, n=6)；EdU 结果表明，hsa_circ_0001707 表达上调可明显增强食管鳞癌细胞增殖能力(p<0.05)；Transwell试验证实，高表达的hsa_circ_0001707可明显提高肿瘤细胞的迁移和侵袭能力(p<0.05)；平板克隆试验结果显示，与对照组相比， hsa_circ_0001707高表达组细胞的克隆形成数量明显增加 (p<0.05)。
4. 当 hsa_circ_0001707 的表达水平受到干扰时，食管鳞癌细胞的活性，增殖能力，克隆形成能力和侵袭迁移能力均显著减弱 (p<0.05)。
三、Hsa_circ_0001707调控食管鳞癌的“分子海绵”机制分析
1. 荧光原位杂交技术 (FISH) 结合核质分离试验结果表明，hsa_circ_0001707在胞质和胞核中均有分布，但主要存在于细胞质中，提示其发挥功能的主要场所在细胞质；
2. Hsa_circ_0001707可以ceRNA方式“竞争性吸附”miR-203a-3p: qRT-PCR结果显示，干扰 hsa_circ_0001707 的表达可明显上调 miR-203a-3p 的表达水平(p<0.05)。构建hsa_circ_0001707的野生型 (WT) 和突变型 (MUT) 报告基因载体，DLR试验验证两者的相互结合关系。结果表明，hsa_circ_0001707 (WT)+miR-203a-3p 组的荧光值显著减弱，与hsa_circ_0001707 (WT) +miR-NC组相比，相对降低约37%；与含有hsa_circ_0001707突变型质粒组相比，荧光素酶活性降低约41%(p<0.001)。
3. 细胞挽救实验结果表明，在 hsa_circ_0001707 稳定干扰的两种食管鳞癌细胞株中转染miR-203a-3p inhibitor后, 可以部分逆转hsa_circ_0001707干扰表达对细胞活性，克隆形成能力及侵袭迁移能力的抑制作用。
4. Hsa_circ_0001707/miR-203a-3p/Snail2 参与调控食管鳞癌细胞的上皮-间充质转化过程: 首先，应用公共数据库预测，同时分析 TCGA 数据库中差异表达mRNA，各组结果取交集，筛选出miR-203a-3p的下游靶基因Snail2。在EC109及EC9706细胞中分别转染miR-203a-3p mimic/NC, western blot及qRT-PCR结果显示，过表达miR-203a-3p可显著抑制Snail2蛋白及mRNA的表达水平 (p<0.05)。进一步地，构建Snail2基因的WT及MUT报告基因载体，双荧光素酶报告基因试验结果显示，miR-203a-3p+Snail2 (WT) 实验组的荧光信号值显著降低，与miR-NC+Snail2 (WT) 组相比，下降约40%；与含有Snail2 突变型质粒组相比，下降约48%(p<0.001)。该结果表明miR-203a-3p可与Snail2 3’UTR 区域特异性结合。
在此基础上，为了进一步验证hsa_circ_0001707可与Snail2竞争性结合miR-203a-3p, 我们分别在两株食管鳞癌细胞中另设两组进行实验：(1) lv-circ-0001707+Snail2 (WT)+miR-203a-3p;(2) lv-NC+Snail2 (WT)+miR-203a-3p。结果显示，与第一组相比， EC109 中第二组的荧光信号值显著减弱，相对降低约 31%。EC9706中第二组的荧光强度相对减弱了27%，差异有统计学意义 (p<0.001)。同时，western blot结果显示，hsa_circ_0001707敲低表达可导致Snail2基因的表达下降，蛋白水平在EC109和EC9706细胞中分别降低了40%, 48%, 差异具有统计学意义 (p<0.05)。
在两株食管鳞癌细胞中分别转染 miR-203a-3p mimic/NC, western blot 检测EMT关键信号因子的表达。结果显示，与miR-NC组相比，EC109细胞中miR-203a-3p mimic 组的 E-cadherin 蛋白表达水平恢复了 30%, 而 N-cadherin 和Vimentin的蛋白表达水平下降，相对降低了40%, 32%(p<0.05)。在EC9706细胞中，miR-203a-3p mimic 组的E-cadherin蛋白表达明显上调，增加了31%。同时， N-cadherin和Vimentin的蛋白水平受到抑制，分别降低了35%, 44%(p<0.05)。
在两种 hsa_circ_0001707 稳定干扰的食管鳞癌细胞株中，进一步检测 EMT通路关键信号因子的表达。结果表明，在EC109细胞中敲低hsa_circ_0001707的表达后，可导致N-cadherin和vimentin的表达下降，与空载体组相比，分别下降55%, 63%。而上皮型钙粘附蛋白 E-cadherin 的蛋白水平显著升高，相对恢复了30% (p<0.05)。转染了 miR-203a-3p inhibitor 后,可以部分逆转这一结果。与 sh-circ-0001707组相比，E-cadherin的表达水平下调20%，N-cadherin和vimentin的表达水平分别上调 27%, 29% (p<0.05)。在另一株细胞 EC9706 中对hsa_circ_0001707敲低处理后，与对照组相比，E-cadherin的蛋白水平恢复了35%， N-cadherin 和 vimentin 的蛋白表达降低，分别下降 57%, 60% (p<0.05)。提示hsa_circ_0001707 表达下调后可以抑制食管鳞癌细胞的 EMT 发生。此结果在转染 miR-203a-3p inhibitor 后得到逆转，相较于 sh-circ-0001707 组，miR-203a-3p inhibitor组的E-cadherin蛋白表达水平降低了17%，而N-cadherin和vimentin的蛋白表达水平有所恢复，分别升高了20%, 17%(p<0.05)。
结论：
1. Hsa_circ_0001707在食管鳞癌组织中表达上调，高表达的hsa_circ_0001707可以增加食管鳞癌的发病风险，对于食管鳞癌具有较好的诊断准确性，是潜在的生物标志物。
2. Hsa_circ_0001707过表达可以提高细胞活性，增强细胞增殖能力，克隆形成能力，促进细胞侵袭迁移。干扰其表达后可以抑制食管癌细胞的恶性表型，表明hsa_circ_0001707在食管癌细胞中发挥着癌基因样的作用。
3. Hsa_circ_0001707可以作为miR-203a-3p的“分子海绵”，间接调控其下游靶基因Snail2的表达。Hsa_circ_0001707/miR-203a-3p/Snail2信号通路轴参与调控食管鳞癌细胞的上皮-间充质转化过程。