【摘 要】
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为了探讨脂筏(lipid raft)在人类疱疹病毒6型(HHV-6)的装配与在病毒感染中的作用,用HHV-6 GS株感染HSB2细胞,用非离子去污剂Triton X-100提取脂筏成分,利用Western Blot分析H
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为了探讨脂筏(lipid raft)在人类疱疹病毒6型(HHV-6)的装配与在病毒感染中的作用,用HHV-6 GS株感染HSB2细胞,用非离子去污剂Triton X-100提取脂筏成分,利用Western Blot分析HHV-6包膜糖蛋白与脂筏的相关性。并用免疫荧光双标记的方法,从分子共定位的角度研究HHV-6糖蛋白B(gB)与GPI锚固蛋白CD59分子以及神经节苷脂GM1分子之间的表达与分布关系。结果显示,HHV-6包膜糖蛋白B、H、L、Q1和Q2(gB、gH、gL、gQ1和gQ2)分布在脂筏部位。激光共聚焦显微镜可观察到CD59分子及GM1均与HHV-6包膜糖蛋白B有着相同的分布。另外,在纯化的HHV-6颗粒中检测到了脂筏的指示剂GM1分子。为了探讨构成病毒包膜的脂筏成分在病毒感染中的作用,用甲基-β-环糊精(MβCD)从HHV-6颗粒中去除脂筏的主要组成成分胆固醇,结果显示,病毒的感染呈剂量依赖性降低,而补充外源性胆固醇后可恢复其感染率。用胆固醇提取剂MβCD处理后,HHV-6病毒颗粒虽然能够与靶细胞结合但不能进入到细胞内部。本研究的结果揭示了脂筏提供HHV-6装配的平台,且病毒包膜中的脂筏成分在病毒的感染过程中起着重要的作用。
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