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脊髓灰质炎病毒（Poliovirus，PV）是脊髓灰质炎的病原体。主要是通过侵犯中枢神经系统，引发弛缓性肌肉麻痹。自1988年由世界卫生组织（WHO）提出的“到2000年全球消灭脊髓灰质炎”的决议后，脊髓灰质炎病例减少了99%以上，从当时估计的35万例减至2013年报告的416例；脊髓灰质炎流行国家从1988年的125个减少至2017年的2个（巴基斯坦、阿富汗），世界正处于根除脊髓灰质炎的边缘。脊灰病毒单克隆抗体对于病脊灰病毒流行病学监视、疫苗免疫水平评估和衍生型病例研究具有重要的意义。本论文对脊灰病毒 Sabin株 I型单克隆抗体的制备进行了探讨。
用 Vero细胞成功增殖出脊灰病毒 Sabin株 I型，通过逆转录扩增病毒 RNA的VP1基因、同时送于湖北省疾病预防控制中心鉴定，确定了该病毒为脊灰病毒Sabin株 I型。Reed-Muench法测得用 Vero细胞增殖脊灰病毒效价为108.217 TCID50/0.1mL。同时分别扩增了脊灰病毒 Sabin株 I型、II型和 III型并进行了效价的测定，I、II、III型病毒液接种细胞基本在4~5天内出现完全CPE。
收集1 L脊灰病毒 Sabin株I型培养液，通过PEG浓缩。再经过蔗糖密度梯度离心纯化病毒。SDS-PAGE电泳验证了病毒的结构蛋白 VP1、VP2、VP3的存在。纯化病毒蛋白含量为2.764 mg/mL。
用纯化的脊灰病毒 Sabin株 I型，按每2周一次免疫、第4次加强免疫 SPF级Balb/c小鼠（6~8周龄、雌性），共免疫4批次小鼠。通过方阵滴定试验确定了抗原的最佳包被浓度，建立筛选抗体的方法间接ELISA，半数小鼠免疫血清效价达到6,400以上。
在第4次免疫后的第4天，取免疫小鼠免疫脾淋巴细胞，与骨髓瘤细胞（SP2/0-Ag14）经过PEG融合，六次的细胞融合率分别为15.63%、3.12%、66.49%、33.33%、46.65%、14.21%；利用间接 ELISA法筛选到8株阳性杂交瘤细胞，并通过有限稀释法克隆得到1株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 G8G7；细胞培养法制备的单抗，利用间接 ELISA测得抗体效价为1:8，中和试验测得中和抗体效价为1:58。
用 Vero细胞成功增殖出脊灰病毒 Sabin株 I型，通过逆转录扩增病毒 RNA的VP1基因、同时送于湖北省疾病预防控制中心鉴定，确定了该病毒为脊灰病毒Sabin株 I型。Reed-Muench法测得用 Vero细胞增殖脊灰病毒效价为108.217 TCID50/0.1mL。同时分别扩增了脊灰病毒 Sabin株 I型、II型和 III型并进行了效价的测定，I、II、III型病毒液接种细胞基本在4~5天内出现完全CPE。
收集1 L脊灰病毒 Sabin株I型培养液，通过PEG浓缩。再经过蔗糖密度梯度离心纯化病毒。SDS-PAGE电泳验证了病毒的结构蛋白 VP1、VP2、VP3的存在。纯化病毒蛋白含量为2.764 mg/mL。
用纯化的脊灰病毒 Sabin株 I型，按每2周一次免疫、第4次加强免疫 SPF级Balb/c小鼠（6~8周龄、雌性），共免疫4批次小鼠。通过方阵滴定试验确定了抗原的最佳包被浓度，建立筛选抗体的方法间接ELISA，半数小鼠免疫血清效价达到6,400以上。
在第4次免疫后的第4天，取免疫小鼠免疫脾淋巴细胞，与骨髓瘤细胞（SP2/0-Ag14）经过PEG融合，六次的细胞融合率分别为15.63%、3.12%、66.49%、33.33%、46.65%、14.21%；利用间接 ELISA法筛选到8株阳性杂交瘤细胞，并通过有限稀释法克隆得到1株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 G8G7；细胞培养法制备的单抗，利用间接 ELISA测得抗体效价为1:8，中和试验测得中和抗体效价为1:58。