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研究目的:原纤毛(primary cilia)可参与多种信号通路,进而可能调控肿瘤的发生发展。细胞中心粒微卫星处的OFD1(Oral-FacialDigital type I syndrom,OFD1)蛋白能抑制原纤毛形成。自噬激活与原纤毛的形成之间存在着相互联系,自噬可降解OFD1从而诱导原纤毛形成。原纤毛在葡萄膜黑色素瘤(Uveal Melanoma,UM)发生中的关键作用及其调控机制有待进一步研究。本课题旨在诱导UM形成原纤毛,试图揭示原纤毛在UM发生中的关键作用。研究内容和方法:1.检测UM中原纤毛形成的情况,基础性自噬水平以及OFD1蛋白的表达情况。2.通过激活自噬促进原纤毛形成,通过CCK8、平板克隆形成、细胞周期和Transwell实验检测原纤毛形成后UM的肿瘤学特性。3.检测原纤毛形成以后OFD1蛋白的表达情况,通过稳转细胞系建立、CCK8、平板克隆形成、细胞周期和Transwell实验检测OFD1是否影响UM的肿瘤学特性。研究结果:1.UM中原纤毛形成降低,基础性自噬水平较低,OFD1蛋白表达较高。2.激活自噬可以促进UM原纤毛形成,自噬激活以后降解了OFD1蛋白,同时抑制增殖,阻滞细胞周期,抑制迁移。3.敲除UM中的OFD1蛋白可以抑制增殖、阻滞细胞周期,但不影响迁移。研究结论:激活自噬促进UM原纤毛的形成,降解中心粒微卫星处的OFD1蛋白,从而抑制UM增殖,阻滞细胞周期。研究目的:长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lnc RNA)作为基因调控网络整体构架的一部分,通过调控蛋白编码基因发挥着重要作用,与人类疾病密切相关。眼肿瘤中的视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)是儿童眼内最常见的原发性恶性肿瘤,易侵犯视神经甚至转移至颅内,可对患者生命造成严重伤害。本课题寻求视网膜母细胞瘤中的特异性lnc RNA,探索其对视网膜母细胞瘤的作用,为视网膜母细胞瘤的基因靶向治疗提供理论依据。研究方法:1.通过PCR检测肿瘤中特异性CUM1的表达;构建过表达稳转系。2.通过CCK8、平板克隆实验检测CUM1对肿瘤学特性的影响。研究结果:CUM1是RB中低表达的长非编码RNA,过表达CUM1可以抑制RB在体外的增殖。研究结论:在RB中发现了一条起一定调控作用的lnc RNA,并证明了其对肿瘤学特性的调控作用