柴胡黄酮对递增负荷运动小鼠氧化损伤防护作用的研究

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guohl_sh
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研究目的:小鼠进行为期6周的递增负荷游泳运动,采用柴胡黄酮对小鼠灌胃处理实施药物干预,测定和分析第0、2、4、6周每组小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和脂质过氧化物丙二醛(MDA)的表达水平,股四头肌中SOD mRNA和GSH-Px mRNA的相对表达量,研究柴胡黄酮对小鼠递增负荷运动后小鼠氧化损伤的防护作用,为提高机体抗氧化能力、降低运动后的氧化损伤和开发天然抗氧化补剂提供理论基础的同时,也为科学地训练和教学提供科学理论支撑和物质保障。研究方法:本实验药物柴胡整株取自济南市章丘区庙岭村实验种植基地,经山东中医药大学高德民教授实验室鉴定结果为北柴胡(Bupleurum chinese DC.)。将柴胡整株进行烘干、粉碎后过30目筛处理得到柴胡粉末状,用石油醚进行浸泡、热浴回流脱脂处理后用乙醇进行热浴回流、旋蒸冷凝提取得到柴胡总黄酮溶液,最后冻干处理得到柴胡黄酮粉末。用芦丁作为对照品,测定样品柴胡总黄酮的含量为25.54mg/g。实验对象选用山东大学实验动物中心提供的6周龄雄性健康小鼠102只,体重27.74±2.40g。将小鼠随机分为四组:生理盐水组(NS)、柴胡黄酮组(BF)、黄酮+运动组(BF+E)、生理盐水+运动组(NS+E),每组各24只,再将每组分为二周组、四周组、六周组,每组各8只。小鼠做好标记分笼喂养,选取大小鼠生长繁殖配合饲料喂养;每日进行喂食进水,自由饮食、饮水;每日换垫料一次;每周称鼠体重一次。实验从第一周30分钟到第六周180分钟,每周逐渐递增游泳时间,训练过程中,每天早上8点前对黄酮运动组完成灌胃处理(用药剂量的实验条件探索,100mg/kg为实验的最终用药量,灌药量随小鼠体重变化逐渐增加),休息两小时,10点开始进行游泳训练,水温(30±2)℃,保证每天在相同的时间段开始训练,每组游泳后进行换水。实验分组前,随机抽取6只小鼠处死,取其股四头肌和血清测试各SOD、CAT、GSH-Px、MDA、SOD mRNA、GSH-Px mRNA实验指标作为基础值。实验的第二、四、六周运动结束后,休息24小时,每组随机抽取6只小鼠处死,取其股四头肌和血清。测定血清中SOD、CAT、GSH-Px和MDA含量变化;股四头肌中SOD mRNA和GSH-Px mRNA的表达量、比值变化,采用SPSS22.0统计软件对数据进行统计分析。研究结果:1.SOD:NS+E组中血清SOD表达第六周相较于第二周显著降低(P<0.05)。BF组中SOD表达第二周显著低于零周(P<0.05),第四周和第六周显著低于第二周(P<0.05)。BF+E组中SOD表达第二周极显著低于零周(P<0.01),第六周和第四周极显著低于第二周(P<0.01)。2.CAT:BF组中血清CAT表达第二周极显著低于零周(P<0.05),第六周极显著低于零周(P<0.01),第四周显著高于第二周(P<0.05)。NS+E组、BF+E组均无显著性差异。3.GSH-Px:每组之间和每周之间小鼠血清GSH-Px表达均无显著性差异(P>0.05)。4.MDA:NS+E组血清MDA表达第二周显著低于NS组(P<0.05)。BF组血清MDA表达第二周显著低于NS组(P<0.05)。BF+E组血清MDA表达第二周显著低于NS组(P<0.05),第四周极显著低于NS组(P<0.01)。5.SOD mRNA:每组之间和每周之间小鼠股四头肌SOD mRNA表达均无显著性差异(P>0.05)。6.GSH-Px mRNA:NS+E组中股四头肌GSH-Px mRNA表达第四周显著高于零周(P<0.05)、显著高于NS组(P<0.05),第六周极显著高于零周(P<0.01)、显著高于第二周(P<0.05)、极显著高于NS组(P<0.01)。BF组股四头肌GSH-Px mRNA表达第四周极显著高于NS组(P<0.01),第六周显著低于NS+E组(P<0.05)。BF+E组中股四头肌GSH-Px mRNA表达第四周显著高于NS组(P<0.05)、极显著高于零周(P<0.01)、显著高于第二周(P<0.05)第六周极显著高于NS组(P<0.01)、极显著高于零周(P<0.01)、极显著高于第二周(P<0.01)。研究结论:在安静状态下,柴胡黄酮能促进血清SOD、CAT、GSH-Px抗氧化酶和股四头肌SOD、GSH-Px抗氧化酶的活性,降低MDA浓度,有效清除自由基,提高机体抗氧化能力,减少氧化损伤。在递增负荷游泳运动过程中,柴胡黄酮能够更好地发挥其作用,促进血清SOD、CAT、GSH-Px抗氧化酶和股四头肌SOD、GSH-Px抗氧化酶的活性,降低血清MDA浓度,清除自由基,提高机体抗氧化能力,减少氧化损伤。
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