【摘 要】
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研究目的:通过模拟鼻中隔的相关结构,制备TGF-β1浓度梯度水凝胶支架材料,探究其对骨髓间充质干细胞成软骨能力的相关研究,为临床鼻中隔穿孔的治疗提供新的思路。研究方法:1
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研究目的:通过模拟鼻中隔的相关结构,制备TGF-β1浓度梯度水凝胶支架材料,探究其对骨髓间充质干细胞成软骨能力的相关研究,为临床鼻中隔穿孔的治疗提供新的思路。研究方法:1、兔骨髓间充质干细胞的提取、培养、传代;通过HE染色观察细胞的形态。2、TGF-β1对兔骨髓间充质干细胞成软骨能力的研究:通过CCK-8测定TGF-β1对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响;通过甲苯胺蓝、番红O及阿利新蓝染色、二型胶原免疫组化观察软骨分化能力。3、制备TGF-β1浓度梯度水凝胶支架并且进行材料的表征、材料的生物相容性及材料的释放速率的相关研究。4、TGF-β1浓度梯度水凝胶支架材料通过荧光染色观察细胞的粘附、通过甲苯胺蓝及阿利新蓝染色观察材料中软骨蛋白多糖分泌、番红O染色观察软骨基质形成、免疫组化观察二型胶原的生成及通过PCR从基因水平来评估软骨细胞的生成。研究结果:1、兔骨髓间充质干细胞一般为梭形、旋涡型生长;第5代细胞具有最强的增殖能力及稳定的分化能力。2、CCK-8显示TGF-β1对兔骨髓间充质干细胞具有增殖能力;TGF-β1对兔骨髓间充质干细胞分泌蛋白多糖、软骨细胞基质和二型胶原有促进作用,能帮助其向软骨细胞分化。3、TGF-β1浓度梯度水凝胶支架是一种多孔的支架,具有稳定的生物相容性,不对细胞产生毒副作用,并且可以持续释放TGF-β1,形成一个稳定的促进细胞分化的浓度,从而使兔骨髓间充质干细胞增殖分化为软骨细胞。结论:TGF-β1浓度梯度水凝胶支架材料具有稳定的生物形容性及多孔支架作用,可以促进软骨细胞的增值,对软骨修复有较强的促进作用,可以为临床鼻中隔穿孔的治疗提供新的思路。
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