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血管/淋巴管新生与肿瘤细胞生长、存活有关、组织浸润及远处转移密切相关。血液系统疾病也存在病理性的血管新生。但与实体瘤不同的是,造血细胞与内皮细胞来源于一个共同的干细胞—成血-血管干细胞(hemangioblast),两者的同源性以及肿瘤细胞的返祖及异质性特征,对血液肿瘤而言血管新生又有其特殊的含义。VEGF-C是VEGFs家族新成员,主要由炎性细胞因子调控,有VEGFR-2(KDR或Flk-1)和VEGFR-3(Flt-4)两种受体。VEGFR-3主要表达于成熟机体淋巴管,及伤口和肿瘤组织有孔毛细血管中,可以和所有阶段的VEGF-C蛋白结合调控淋巴管生成;而VEGFR-2最主要的是血管内皮细胞表达,参与血管生成的调控。VEGF-C还可以募集肿瘤或炎症组织局部的巨噬细胞。巨噬细胞对于肿瘤而言既释放促进血管新生因子;又是活化T细胞、B细胞免疫反应的主角。VEGFs与其受体VEGFR结合促进骨髓血管内皮细胞增殖及骨髓血管伸展,并且内皮细胞特异的酪氨酸激酶活性受体和/或配体也在一些血液肿瘤细胞中表达。在临床标本检测中发现多种急、慢性白血病肿瘤细胞相当一部分表达VEGFR-2,3,同时又分泌VEGF-C,且随访发现这些受体蛋白的表达与临床分期、疗效和预后有关。内皮细胞来源的VEGF-C证实以一种旁分泌形式通过VEGFR-3途径介导白血病细胞增殖、存活、耐药。近年来在实体瘤动物实验显示阻断FLT-4信号有令人鼓舞的结果。具有抑制血管新生作用的沙利度胺已在难治性多发性骨髓瘤及MDS是骨髓瘤临床治疗治疗方面获得了良好的效果。本研究旨在基础和临床两方面对VEGF-C的功能作进一步探讨。通过在体外构建VEGF-C的真核细胞表达载体;体外细胞模型实验和裸鼠模型体内实验来探索VEGF-C是否通过VEGFR-2,3途径影响白血病细胞增殖、存活及耐药等生物学性状;同时检测VEGF-C及其受体在慢性粒细胞性白血病临床标本的表达并初步探讨其意义。1. VEGF-C真核表达载体的构建及蛋白表达为研究VEGF-C蛋白在血液肿瘤细胞中的作用奠定基础,我们采用RT-PCR检测本研究所保存的9种白血病细胞株及实体瘤、内皮细胞cDNA,发现血液肿瘤细胞株中NB4, HEL, RPMI8226 3种细胞株细胞表达VEGFR-3基因,HEL、TF-1为VEGFR-2+细胞株。自行设计一对VEGF-C引物,RT-PCR从肺癌A549细胞株