紫杉醇是一种高效、低毒、广谱、作用机制独特的天然抗肿瘤药物。紫杉醇的市场供应受制于原料来源和制备技术两方面的制约，使得药价昂贵。而真菌大规模工业发酵生产紫杉醇具有诱人的发展前景，将产生巨大的市场效益和社会效益。　　 本实验室从废纸中分离筛选到一株腐生真菌拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sp.)NK-17，经过TLC、HPLC、MS、NMR分析证实此菌的发酵产物中确实含有紫杉醇，产量为400μg/L，但仍不能满足工业化生产所需，所以需要对菌株进行改造以构建高产菌株。　　 为了探究NK-17中紫杉醇的代谢途径，本文利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导转化的方法建立了NK-17的基因组随机突变库。首先将携带构巢曲霉色氨酸合成基因(TRPC)的启动子的潮霉素B磷酸转移酶基因(HPH)的二元载体，用CaCl2法转化根癌农杆菌LBA4404，然后将此重组根癌农杆菌与NK17的孢子在24℃下共培养48 h，以潮霉素抗性基因作为筛选标记而获得大量转化子。　　 本文将单孢分离纯化后的NK-17转化子的发酵产物经过TLC法初步鉴定、HPLC定性定量检测及MS分析，筛选得到4株发酵产物不含紫杉醇的转化子，分别命名为TX-27、TX-79、TX-95、TX-158。Southern blot结果显示TX-79、TX-95均为T-DNA单拷贝随机插入，TX-27为双拷贝随机插入，TX-158为三拷贝随机插入。以TX-79为研究对象，利用反向PCR技术获得其基因组中T-DNA的侧翼序列。将测序后的序列递交NCBI进行序列比对后发现此基因编码的蛋白序列与黑曲霉Aspergillus niger CBS 513.88参与次级代谢物的合成，运输，分解的蛋白咪唑酮丙酸酶序列相似性最高，说明该基因很可能是调控紫杉醇合成的关键基因。