赭曲霉毒素A暴露影响猪精子活力及颗粒细胞生长的研究

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赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)是一种常见的饲料霉菌毒素,对动物的健康养殖造成了广泛危害,但人们对于OTA危害动物繁殖性能的研究较少,其毒害发生的机制还不甚清楚。为了深入研究OTA暴露对猪繁殖力的危害,尤其对猪精子活力和卵泡生长发育的影响,本研究利用猪精子体外成熟体系和卵巢颗粒细胞体外培养体系,并借助分子和细胞生物学技术以及转录组测序分析技术,系统研究了OTA暴露对猪精子活力和颗粒细胞功能的影响及其机制。
  猪精子体外暴露OTA24h,精子运动性显著降低。通过流式细胞仪检测发现,OTA处理组的精子ROS水平显著提高。WesternBlot检测结果表明,OTA暴露导致精子PTEN蛋白的表达升高,抑制了AKT磷酸化,进而激活AMPK蛋白并引起ATP酶相关蛋白表达降低,这些变化最终导致猪精子活力下降。此外,OTA暴露还会引起精子凋亡相关蛋白的表达变化。
  在猪卵巢颗粒细胞体外培养时暴露OTA,OTA会抑制颗粒细胞活力并呈现剂量与时间依赖性。OTA暴露颗粒细胞-卵母细胞复合体时,OTA可通过颗粒细胞抑制卵母细胞的体外成熟。OTA暴露会引起颗粒细胞氧化应激水平增强,抑制细胞增殖,并引起细胞凋亡。借助RNA-seq分析,发现OTA暴露会显著影响颗粒细胞凋亡和增殖相关基因的表达,其中OTA暴露对PI3K/AKT信号通路的影响与颗粒细胞凋亡和增殖有相关性。
  综上所述,OTA暴露会通过PTEN/AMPK信号通路引起猪精子活力降低,会通过调控PI3K-AKT信号通路影响卵巢颗粒细胞生长。
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