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目的：
麦芽传统用于治疗乳汁分泌异常。临床上也证实麦芽具有能够改善异常泌乳的作用，主要用于高泌乳素血症的临床治疗，但麦芽抗高泌乳素血症的机制仍不明确。本研究在前期实验基础上，通过细胞实验，对麦芽中有效成分抑制泌乳素的作用靶点与作用机制进行探索，为临床使用麦芽治疗高泌乳素血症提供参考及理论依据。
方法：
（一）采用CCK-8法筛选MMQ细胞和GH3细胞最佳培养时间；酶联免疫吸附法（ELISA）、实时荧光定量法（Real-Time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞PRL水平，分别筛选麦芽总生物碱、大麦芽碱和芦竹碱的有效实验浓度。
（二）使用多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇预处理MMQ细胞，分别加入麦芽总生物碱与大麦芽碱继续培养。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；采用Real-Time PCR与Western blot检测细胞DRD2水平；采用ELISA检测cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。
（三）分别使用麦芽总生物碱和大麦芽碱培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞，采用Real-Time PCR检测DRD2和DAT mRNA表达水平，Western blot检测细胞DRD2和DAT蛋白表达水平。
（四）麦芽总生物碱、大麦芽碱分别与腺苷酸环化酶激动剂联合培养MMQ细胞。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；ELISA检测细胞cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。麦芽总生物碱、大麦芽碱分别与蛋白激酶A激动剂联合培养MMQ细胞。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；ELISA检测细胞cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。
（五）正交试验设计优化麦芽总生物碱颗粒剂处方，根据成型率、堆密度、休止角和吸湿性进行评分。通过检测溶化性、干燥失重和粒度对最佳处方进行质量控制，并使用高效液相色谱法对麦芽总生物碱颗粒剂中的大麦芽碱进行含量测定。
结果：
（一）35.2、70.4μg/mL麦芽总生物碱组及3.25、6.5μg/mL大麦芽碱组MMQ细胞PRL水平明显降低（P＜0.05），但GH3细胞PRL水平无显著变化。
（二）与麦芽总生物碱组相比，麦芽总生物碱+氟哌啶醇组MMQ细胞PRL显著升高（P＜0.05）；与大麦芽碱组相比，大麦芽碱+氟哌啶醇组MMQ细胞PRL显著升高（P＜0.05）。麦芽总生物碱组及大麦芽碱组MMQ细胞DRD2水平明显升高（P＜0.05），cAMP含量明显降低，PKA与CREB活性减少（P＜0.05）。与麦芽总生物碱组相比，麦芽总生物碱+氟哌啶醇组DRD2表达明显减少，PRL分泌明显增加，cAMP/PKA/CREB表达增加（P＜0.05）。
（三）麦芽总生物碱组及大麦芽碱组PC12细胞DRD2、DAT表达水平显著升高（P＜0.05）。
（四）与Forskolin组相比，麦芽总生物碱+Forskolin组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达均无显著变化。与8-Bromo-cAMP组相比，麦芽总生物碱+8-Bromo-cAMP组MMQ细胞PRL分泌明显减少（P＜0.05），cAMP/PKA/CREB表达明显减少（P＜0.05）。与Forskolin组相比，大麦芽碱+Forskolin组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达也无显著变化。与8-Bromo-cAMP组相比，大麦芽碱+8-Bromo-cAMP组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达均无明显变化。
（五）正交试验结果显示，糊精∶乳糖∶MCC=1∶2∶1时，颗粒剂的成型性最好；浸膏粉与辅料配比=1∶1，有利于控制剂量。根据最优处方制备的麦芽总生物碱颗粒剂溶化性、粒度和干燥失重均符合2020版《中国药典》规定。麦芽总生物碱中的大麦芽碱含量为4.953mg/g。
结论：
（一）大麦芽碱通过依赖于多巴胺D2受体的单靶点途径发挥抗高泌乳素血症作用：大麦芽碱刺激DRD2，进而启动cAMP/PKA/CREB信号通路降低PRL。
（二）麦芽总生物碱能通过多靶点途径发挥抗高泌乳素血症作用：1.麦芽总生物碱能够激动DRD2，启动cAMP/PKA/CREB信号通路，进而抑制PRL分泌；2.麦芽总生物碱能够直接作用于PKA，通过抑制PKA活性降低PRL水平。
（三）麦芽总生物碱和大麦芽碱均能上调DRD2与DAT，这提示麦芽总生物碱和大麦芽碱至少作用于多巴胺途径的两个组成部分，不仅仅局限于DRD2。
（四）成功制备了符合2020版《中国药典》规定的麦芽总生物碱颗粒剂。
麦芽传统用于治疗乳汁分泌异常。临床上也证实麦芽具有能够改善异常泌乳的作用，主要用于高泌乳素血症的临床治疗，但麦芽抗高泌乳素血症的机制仍不明确。本研究在前期实验基础上，通过细胞实验，对麦芽中有效成分抑制泌乳素的作用靶点与作用机制进行探索，为临床使用麦芽治疗高泌乳素血症提供参考及理论依据。
方法：
（一）采用CCK-8法筛选MMQ细胞和GH3细胞最佳培养时间；酶联免疫吸附法（ELISA）、实时荧光定量法（Real-Time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞PRL水平，分别筛选麦芽总生物碱、大麦芽碱和芦竹碱的有效实验浓度。
（二）使用多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇预处理MMQ细胞，分别加入麦芽总生物碱与大麦芽碱继续培养。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；采用Real-Time PCR与Western blot检测细胞DRD2水平；采用ELISA检测cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。
（三）分别使用麦芽总生物碱和大麦芽碱培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞，采用Real-Time PCR检测DRD2和DAT mRNA表达水平，Western blot检测细胞DRD2和DAT蛋白表达水平。
（四）麦芽总生物碱、大麦芽碱分别与腺苷酸环化酶激动剂联合培养MMQ细胞。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；ELISA检测细胞cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。麦芽总生物碱、大麦芽碱分别与蛋白激酶A激动剂联合培养MMQ细胞。采用ELISA、Real-Time PCR和Western blot检测细胞PRL水平；ELISA检测细胞cAMP含量，Western blot检测细胞PKA-C、CREB及p-CREB蛋白表达水平。
（五）正交试验设计优化麦芽总生物碱颗粒剂处方，根据成型率、堆密度、休止角和吸湿性进行评分。通过检测溶化性、干燥失重和粒度对最佳处方进行质量控制，并使用高效液相色谱法对麦芽总生物碱颗粒剂中的大麦芽碱进行含量测定。
结果：
（一）35.2、70.4μg/mL麦芽总生物碱组及3.25、6.5μg/mL大麦芽碱组MMQ细胞PRL水平明显降低（P＜0.05），但GH3细胞PRL水平无显著变化。
（二）与麦芽总生物碱组相比，麦芽总生物碱+氟哌啶醇组MMQ细胞PRL显著升高（P＜0.05）；与大麦芽碱组相比，大麦芽碱+氟哌啶醇组MMQ细胞PRL显著升高（P＜0.05）。麦芽总生物碱组及大麦芽碱组MMQ细胞DRD2水平明显升高（P＜0.05），cAMP含量明显降低，PKA与CREB活性减少（P＜0.05）。与麦芽总生物碱组相比，麦芽总生物碱+氟哌啶醇组DRD2表达明显减少，PRL分泌明显增加，cAMP/PKA/CREB表达增加（P＜0.05）。
（三）麦芽总生物碱组及大麦芽碱组PC12细胞DRD2、DAT表达水平显著升高（P＜0.05）。
（四）与Forskolin组相比，麦芽总生物碱+Forskolin组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达均无显著变化。与8-Bromo-cAMP组相比，麦芽总生物碱+8-Bromo-cAMP组MMQ细胞PRL分泌明显减少（P＜0.05），cAMP/PKA/CREB表达明显减少（P＜0.05）。与Forskolin组相比，大麦芽碱+Forskolin组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达也无显著变化。与8-Bromo-cAMP组相比，大麦芽碱+8-Bromo-cAMP组MMQ细胞PRL分泌，及cAMP/PKA/CREB表达均无明显变化。
（五）正交试验结果显示，糊精∶乳糖∶MCC=1∶2∶1时，颗粒剂的成型性最好；浸膏粉与辅料配比=1∶1，有利于控制剂量。根据最优处方制备的麦芽总生物碱颗粒剂溶化性、粒度和干燥失重均符合2020版《中国药典》规定。麦芽总生物碱中的大麦芽碱含量为4.953mg/g。
结论：
（一）大麦芽碱通过依赖于多巴胺D2受体的单靶点途径发挥抗高泌乳素血症作用：大麦芽碱刺激DRD2，进而启动cAMP/PKA/CREB信号通路降低PRL。
（二）麦芽总生物碱能通过多靶点途径发挥抗高泌乳素血症作用：1.麦芽总生物碱能够激动DRD2，启动cAMP/PKA/CREB信号通路，进而抑制PRL分泌；2.麦芽总生物碱能够直接作用于PKA，通过抑制PKA活性降低PRL水平。
（三）麦芽总生物碱和大麦芽碱均能上调DRD2与DAT，这提示麦芽总生物碱和大麦芽碱至少作用于多巴胺途径的两个组成部分，不仅仅局限于DRD2。
（四）成功制备了符合2020版《中国药典》规定的麦芽总生物碱颗粒剂。