加米霉素属于大环内脂类动物专用抗生素,通过抑制细菌RNA依赖性蛋白合成而起到抑菌和杀菌的作用。加米霉素经皮下注射后,迅速吸收,达峰时间短,具有较高的生物利用度,可以在肺组织达到较高的组织浓度。对引起牛呼吸系统疾病(BRD)的溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌及牛支原体等均有较高的抗菌活性。本研究建立HPLC-MS/MS检测牛组织和血浆中加米霉素的含量。测得牛组织和血浆在2~400μg/kg的范围内,呈现良好的线性范围(r>0.99)。高、中、低三个质控浓度的批间变异系数均小10%。该方法的检测限和定量限分别为0.5μg/kg和2μg/kg。该方法具有简单、快速、高效等特点,满足残留分析的要求。在高(400ng/mL)、中(40ng/mL)、低(2ng/mL)的基质效应考察中,待测样品并未表现出相应的基质效应。我们分别考察了加米霉素储备液稳定性,样品处理后稳定性,反复冻融以及样品长期保存稳定性。试验结果表面,加米霉素在上述条件下具有良好的稳定性。本试验选择20头健康牛,雌、雄各半,体重170~250 kg。购买后临床观察一周,试验前要求临床健康,按试验要求将试验牛分成5组,每组4头,每组雌、雄各半。给药后在不同时间点,将牛只屠宰,每次屠宰1组,采集肝、肾、肌肉和脂肪。给药前及给药后7d、21d、35d、49d分别采集相应的器官,待机检测。试验结果表明:加米霉素在动物组织中以7d时药物浓度含量最高,肝脏浓度最高为3040μg/kg,其次是肾脏,为2200μg/kg。肌肉和脂肪分别为330μg/kg、233μg/kg。根据WT1.4软件,参照EMA最高残留限量规定,估测15%加米霉素注射液皮下注射给药后,各组织的休药期分别为:肝脏48.4 d、肾43.8 d、脂肪44 d。因为肌肉无MRL值,无法计算休药期。综合各组织中总残留量和最高残留限量规定,建议15%加米霉素注射液在牛皮下注射后的休药期定为49d。