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背景： NK细胞具有高度异质性，根据细胞表面CD27分子的表达，小鼠的NK细胞可分为CD27high和CD27low/-亚群。已报道，NK细胞可在实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）发病前期调控疾病的发生和发展，然而CD27 NK细胞亚群在EAE发病前期的作用还未见报道。 目的： 利用小鼠EAE模型，探讨CD27high和CD27low/-NK细胞在EAE发病前期的作用和机制。 方法： 1.制备小鼠EAE模型，造模后前10天为发病前期。选取EAE发病前期不同时间点进行以下检测： （1）流式检测CD27 NK细胞亚群比例的动态变化； （2）流式检测DC和Mφ表面CD70表达的动态变化； （3）流式检测CD27 NK细胞亚群表型及功能的变化； （4）免疫荧光检测NK细胞和抗原提呈细胞的定位。 2.使用两步磁珠分选的方法得到CD27high和CD27low/-细胞亚群。分选得到的CD27细胞亚群用于以下实验： （1）流式检测两群NK细胞对BMDCs和BMDMs成熟的影响； （2）流式检测两群NK细胞对T细胞的增殖的影响； （3）流式和ELISA检测两群NK细胞对Th17细胞分化的影响； （4）分别输注相同数量的两群NK细胞后，观察小鼠EAE评分的变化。 结果: 1. CD27 NK细胞亚群自身的变化： （1）在脾脏、淋巴结、骨髓和外周血均检测到CD27high NK细胞占总NK细胞比例降低，CD27low/-NK细胞比例增高； （2）EAE早期NK细胞并未明显成熟，NK细胞表达CD27与APCs表达的CD70不成负相关； （3）Day5时，脾脏内的CD27high NK细胞表面活化性受体Ly49D、Ly49H和NKG2D表达下降，抑制性受体Ly49C/I表达下降，IFN-γ的产生减少；脾脏内的CD27low/-NK细胞受体表达水平变化不明显，表面CD107a的表达水平增加；淋巴结内两群NK细胞产生IFN-γ和CD107a变化不明显。 2. CD27 NK细胞亚群对抗原提呈细胞的影响： （1）随EAE病程的发展，NK细胞数目增多，同时NK细胞和主要的抗原提呈细胞（DC或Mφ）之间的接触增多； （2） CD27high NK细胞刺激使BMDCs更成熟；CD27high NK细胞刺激使BMDMs更成熟。 3. CD27 NK细胞亚群对T细胞的影响： （1）不论DC存在与否，CD27high NK细胞均抑制T细胞的增殖；CD27low/-NK细胞只在DC存在时发挥抑制作用。 （2）不论DC存在与否，CD27high NK细胞均抑制Th17产生及IL-17A的分泌，CD27low/-NK细胞只在含DC体系中发挥抑制作用。 4. CD27 NK细胞亚群转输对EAE评分的影响： CD27low/-NK细胞转输EAE评分加重，CD27high NK细胞转输组EAE评分无明显变化。 结论： 1．EAE发病前期，CD27high NK细胞（比例、绝对数）减少，CD27low/-NK细胞增加；且CD27high NK细胞并未转换为CD27low/-NK细胞。 2．CD27low/-NK细胞在EAE发病前期主要起促进作用，机制是该群细胞比例增加，表型和功能保持稳定，促进DC的成熟，且不能有效抑制T细胞增殖和Th17分化。 3．CD27high NK在EAE发病前期对疾病的严重程度没有明显的影响，可能与其功能受损有关进而抑制作用受损相关。